盐酸氟西汀调控神经干细胞信号通路及下游基因表达的实验研究

论文摘要

目的应用P13K特异性阻滞剂LY294002孵育大鼠神经干细胞,探讨P13K信号转导途径在神经干细胞中的作用。方法体外分离、培养大鼠NSCs,应用不同浓度的LY294002孵育NSCs后进行WTS-8、BrdU和βTubulin-Ⅲ检测。结果低浓度的LY294002对NSCs的存活、增殖和分化没有明显影响,在LY294002较高浓度时,NSCs的存活率明显下降（P＜0.05）、BrdU和βTubulin-Ⅲ的阳性细胞数明显少于正常对照组（P＜0.05）。结论PI3K信号转导途径对大鼠NSCs的存活、增殖、分化起重要作用。目的应用MAPKK/MEK特异性阻滞剂PD98059孵育大鼠神经干细胞,探讨MAPK信号通路在神经干细胞中的作用。方法体外分离、培养大鼠NSCs,应用不同浓度的PD98059孵育NSCs后进行WTS-8、BrdU和βTubulin-Ⅲ检测。结果低浓度的PD98059对NSCs的存活、增殖和分化没有明显影响,在PD98059较高浓度时,NSCs的存活率明显下降（P＜0.05）、BrdU和βTubulin-Ⅲ的阳性细胞数明显少于正常对照组（P＜0.05）。结论MAPK信号通路对大鼠NSCs的存活、增殖、分化起重要作用。目的应用PI3K特异性阻滞剂LY294002、MAPKK/MEK特异性阻滞剂PD98059和选择性5-羟色胺再摄取抑制剂（selective serotoninreuptake inhibitors,SSRIs）类抗抑郁药物盐酸氟西汀（Fluoxetine）孵育大鼠神经干细胞,探讨盐酸氟西汀对神经干细胞的PI3K/AKT和MAPK/ERK信号通路的影响。方法体外分离、培养大鼠NSCs,分别应用LY294002、PD98059和盐酸氟西汀孵育NSCs后进行Western Blotting检测。结果Western Blotting检测显示盐酸氟西汀能上调磷酸化AKT和磷酸化ERK1/2在蛋白水平的表达。结论在大鼠神经干细胞模型中,盐酸氟西汀可以上调磷酸化AKT和磷酸化ERK1/2的蛋白表达水平,在盐酸氟西汀激活AKT和ERK1/2的过程中,PI3K/AKT信号通路与MEK/ERK信号通路之间在AKT-ERK1/2水平存在着“对话”（cross-talk）现象。目的应用PI3K特异性阻滞剂LY294002、MEK特异性阻滞剂PD98059和选择性5-羟色胺再摄取抑制剂（selective serotonin reuptakeinhibitors,SSRIs）类抗抑郁药物盐酸氟西汀（Fluoxetine）孵育大鼠神经干细胞,探讨盐酸氟西汀对神经干细胞下游基因表达的影响。方法体外分离、培养大鼠NSCs,分别应用LY294002、PD98059和盐酸氟西汀孵育NSCs后进行real-time RT-PCR检测。结果real-time RT-PCR检测显示盐酸氟西汀能上调BDNF、GDNF、LIF和BCL-2的基因表达,对CNTF和ILGF1/2的基因表达没有影响。结论在大鼠神经干细胞模型中,盐酸氟西汀可以上调BDNF、GDNF、LIF和BCL-2的基因表达水平,而且是通过PI3K/AKT或（和）MEK/ERK信号转导途径上调上述基因的表达。BDNF、GDNF、LIF和BCL-2是与盐酸氟西汀作用相关的下游信号分子靶点,CNTF和ILGF1/2不是盐酸氟西汀作用的下游信号分子靶点。

论文目录

• 英汉缩略语名词对照
• 第一部分
• 中文摘要
• 英文摘要
• 第二部分
• 摘要
• ABSTRACT
• 第三部分
• 摘要
• ABSTRACT
• 第四部分
• 摘要
• ABSTRACT
• 正文
• 第一部分 大鼠神经干细胞PI3K信号转导通路的实验研究
• 前言
• 1. 材料与方法
• 2. 结果
• 3. 讨论
• 4. 结论
• 参考文献
• 第二部分 大鼠神经干细胞MAPK信号转导通路的实验研究
• 前言
• 1. 材料与方法
• 2. 结果
• 3. 讨论
• 4. 结论
• 参考文献
• 第三部分 盐酸氟西汀调控大鼠神经干细胞信号通路的实验研究
• 前言
• 1. 材料与方法
• 2. 结果
• 3. 讨论
• 4. 结论
• 参考文献
• 第四部分 盐酸氟西汀影响大鼠神经干细胞下游基因表达的实验研究
• 前言
• 1. 材料与方法
• 2. 结果
• 3. 讨论
• 4. 结论
• 参考文献
• 文献综述一: 抑郁症与海马神经发生
• 文献综述二: 抗抑郁药物与神经营养因子和细胞信号转导系统
• 附图
• 致谢
• 博士期间发表论文情况