FOXP3和BTLA基因在食管鳞癌中的表达及临床意义

论文摘要

目的:食管癌是常见的消化道恶性肿瘤,我国是高发区,绝大多数是鳞癌。它的发生、发展、浸润和转移与多种因素有关,是一个多基因、多步骤共同作用的过程,但是具体的机制尚不明了。近些年来学者们注意到肿瘤免疫在其中发挥的重要作用,给食管癌的诊断和治疗带来了新的方向。2001年发现的FOXP3（forkhead box P3）基因和2003年发现的BTLA（B and T lymphocyteattenuator,BTLA）基因在肿瘤免疫中的作用越来越受到大家的关注。他们通过不同的机制但又相互联系着发挥免疫抑制作用。本课题的目的在于建立检测人FOXP3和BTLA mRNA含量的实时荧光定量RT-PCR的方法,并用来测定食管鳞癌患者组织中FOXP3和BTLA的基因表达水平,探讨FOXP3和BTLA基因表达水平与食管鳞癌发生发展的关系,以期给食管鳞癌的肿瘤免疫治疗提供一个新的方向。方法:收集临床手术切除的42例食管鳞癌标本和30例对照标本组织。基于TaqMan荧光探针技术,构建克隆载体pMD 18-T-FOXP3和pMD 18-T-BTLA作为定量模板,建立实时荧光定量RT-PCR方法。在GeneAmp 7000型检测仪上测定42例食管鳞癌标本和30例对照标本组织中FOXP3和BTLA mRNA的含量。并且分析FOXP3和BTLA的表达与42例食管鳞癌患者临床、病理资料之间的关系。采用SPSS11.0统计软件进行统计分析,计量资料用（?）±s表示,两组之间比较采用t检验,FOXP3基因与BTLA基因在食管鳞癌中表达的相关性用直线相关统计分析,结果均以P＜0.05为有差异,具有显著意义。结果:FOXP3 mRNA在42例食管鳞癌标本的表达范围为3.4×104～5.3×106拷贝/μg RNA;30例对照标本的表达范围为5.6×102～1.2×104拷贝/μg RNA,食管鳞癌组FOXP3 mRNA的平均拷贝数显著高于对照组[（7.2±2.6）×105vs（6.8±3.4）×103;P＜0.01];BTLA mRNA在42例食管鳞癌标本的表达范围为5.8×103～2.7×105拷贝/μg RNA;30例对照标本的表达范围为2.5×102～6.1×104拷贝/μgRNA,食管鳞癌组BTLA mRNA的平均拷贝数显著高于对照组[（8.8±2.6）×104vs（9.2±3.4）×103;P＜0.01];FOXP3和BTLA mRNA在食管鳞癌组织中的表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小以及分化程度无关（P＞0.05）,但是与患者的TNM分期、区域淋巴结转移有显著的相关性（P＜0.01）。结论:1、成功建立了检测人FOXP3和BTLAmRNA含量的实时荧光定量RT-PCR的方法;2、食管鳞癌组FOXP3 mRNA的表达量高于对照组;3、FOXP3 mRNA表达量与患者的年龄、性别、肿瘤大小和分化程度无关,但与TNM分期、区域淋巴结转移有显著的相关性,有区域淋巴结转移或ⅡB～Ⅲ期的患者国FOXP3 mRNA表达量高于无淋巴结转移及Ⅰ～ⅡA期;4、食管鳞癌组BTLA mRNA的表达量高于对照组;5、BTLA mRNA表达量与患者的年龄、性别、肿瘤大小和分化程度无关,但与TNM分期、区域淋巴结转移有显著的相关性,有区域淋巴结转移或ⅡB～Ⅲ期的患者中BTLA mRNA表达量高于无淋巴结转移及Ⅰ～ⅡA期;6、食管鳞癌组织中FOXP3 mRNA含量与BTLA mRNA含量有正的直线相关关系,但相关性并不强,考虑两者之间还有其他许多因素的干扰。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 缩略词表
• 前言
• 第一章 材料与方法
• 1.临床资料
• 2.主要试剂
• 3.主要仪器
• 4.实验方法
• 5.统计方法
• 第二章 结果
• 1.RNA的纯度和浓度
• 2.检测FOXP3、BTLA基因表达的定量RT-PCR方法的建立
• 3.FOXP3 mRNA在食管鳞癌中的表达量
• 4.BTLA mRNA在食管鳞癌中的表达量
• 5.FOXP3和BTLA mRNA在食管鳞癌组织中表达的相关性
• 第三章 讨论
• 1.FOXP3与食管鳞癌
• 2.BTLA与食管鳞癌
• 3.FOXP3与BTLA在食管鳞癌组织中表达的相关性
• 研究总结
• 文献综述
• 第一节 FOXP3在肿瘤免疫逃逸中的作用
• 第二节 BTLA的研究进展
• 参考文献
• 在读期间发表的论文情况
• 致谢