论文摘要
目的研究炔类黄酮对白血病HL-60细胞增殖和细胞凋亡的影响,探讨炔类黄酮诱导HL-60细胞凋亡的分子机制。方法在体外设定的不同浓度梯度和作用时间,以炔类黄酮分别作用于白血病HL-60细胞,倒置相差显微镜观察细胞形态学变化;MTT法检测细胞生长抑制率;琼脂糖凝胶电泳（DNA ladder）检测染色体DNA断裂情况;流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞周期变化以及细胞表面FAS和FASL的表达;RT-PCR、western分别检测bcl-2,bax,apaf-1,caspase3,caspase8,caspase9基因在mRNA和蛋白水平的表达变化。结果炔类黄酮作用于白血病HL-60细胞后,细胞出现皱缩、粘附性降低、染色体凝集和边集现象;细胞生长受到明显抑制;DNA Ladder可见明显梯形条带;流式细胞仪检测结果发现120μg/ml的炔类黄酮作用72h的细胞凋亡率为29.74%,细胞发生G0～G1期阻滞。RT-PCR、western结果显示bcl-2基因表达减弱,bax,apaf-1,caspase3,caspase9基因表达增强,而FAS,FASL及caspase8的表达无显著性差异。结论及意义炔类黄酮对HL-60细胞具有显著的抑制增殖及诱导凋亡作用。其凋亡机制可能是通过激活caspase-9诱发的线粒体途径,而与死亡受体途径无关。
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