山麦冬的细胞生物学与组织培养研究

论文摘要

山麦冬Liriope spicata （Thunb.） Lour.又名土麦冬,是中药麦冬主流品种湖北麦冬Liriope spicata （Thunb.） Lour. var. prolifera Y.T.Ma的原变种植物。湖北麦冬为湖北省道地药材,应用广泛,与山麦冬关系密切,但相关基础研究较少。本课题为了配合湖北麦冬不育机理的研究,以山麦冬为研究对象,对其遗传学、细胞学及组织培养进行了研究探讨,为其种质资源研究奠定了基础。研究方法及结果如下:1.采用压片法和去壁低渗法对山麦冬染色体进行了核型研究。结果表明压片法用于山麦冬核型分析时,中期分裂相清晰,染色体缺失少。山麦冬为四倍体植物,其核型公式为2 n=4 x=72=48 m+24 sm,遗传进化上属2B型。2.采用压片法和去壁低渗法观察山麦冬小孢子母细胞减数分裂行为及小孢子发育过程,并对山麦冬的花粉活力及畸形率进行研究。结果表明山麦冬小孢子母细胞减数分裂过程基本正常,染色体能正常配对和分离。存在低比率（<0.5%）的畸形现象,如落后染色体、染色体桥等。山麦冬小孢子发育基本正常,成熟花粉为三细胞型。开花期间花粉一直有较高活力,在花开14 h活力达到最大。统计了1 106个山麦冬成熟花粉,其中畸形花粉38个,畸形率为3.44%。3.采用石蜡切片法,对山麦冬的花药发育过程进行观察。结果发现山麦冬花药绒毡层为分泌绒毡层,二分体时期开始解体,至花药完全成熟时,绒毡层和中层细胞彻底消失。绒毡层在花药发育中起了重要作用。4.以改良的MS培养基为基本培养基,采用KT 2.0 mg/L+2,4-D 1.0mg/L进行花药愈伤组织诱导培养时,诱导率最高,为30.77%,生芽培养基采用MS+6-BA 1.52.0 mg/L +NAA 0.10.3 mg/L,生根培养基采用1/2MS+NAA 0.10.3 mg/L。采用压片法对再生植株进行核型分析,发现与自然种植植株核型相同,讨论了核型相同可能的原因。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 第一章 山麦冬的染色体核型分析
• 1. 实验部分
• 1.1 实验材料、试剂和仪器
• 1.2 实验方法
• 1.2.1 压片法
• 1.2.2 去壁低渗法
• 1.2.3 核型分析
• 2. 结果
• 2.1 染色体数目及染色体基数
• 2.2 核型特征
• 3. 讨论
• 第二章 山麦冬小孢子母细胞减数分裂及小孢子发育研究
• 1. 实验部分
• 1.1 实验材料、试剂和仪器
• 1.2 实验方法
• 1.2.1 压片法
• 1.2.2 去壁低渗法
• 1.2.3 花粉活力和畸形率的测定
• 2. 结果
• 2.1 小孢子母细胞减数分裂
• 2.2 小孢子发育
• 2.3 花粉活力及畸形率
• 3. 讨论
• 第三章 山麦冬花药发育的细胞学研究
• 1. 实验部分
• 1.1 实验材料、试剂和仪器
• 1.2 实验方法
• 2. 结果
• 3. 讨论
• 第四章 山麦冬花药离体培养及再生植株研究
• 1. 实验部分
• 1.1 实验材料、试剂和仪器
• 1.2 实验方法
• 2. 结果
• 2.1 低温预处理对诱导愈伤组织的影响
• 2.2 激素对诱导愈伤组织的影响
• 2.3 再生植株核型分析结果
• 3. 讨论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 致谢
• 附录
• 附图Ⅰ 山麦冬小孢子母细胞减数分裂各期分裂相（1）
• 附图Ⅱ 山麦冬小孢子母细胞减数分裂各期分裂相（2）
• 附图Ⅲ 山麦冬小孢子发育各时期图
• 附图Ⅳ 山麦冬花药发育情况
• 附图Ⅴ 山麦冬花药培养结果
• 附图Ⅵ 山麦冬组培苗核型分析结果