鱼腥藻溶血素分泌的理化条件及溶血作用研究

论文摘要

蓝藻在淡水水域和海洋中均有分布,是引起水域发生水华和赤潮的主要种类之一。蓝藻的大量繁殖及蓝藻溶血素的产生会造成水质恶化,危害人和水生生物的健康,从而造成鱼类和贝类的减产,给水产养殖业造成了极大经济损失。因此,本文在国家自然科学基金项目的支持下,通过对鱼腥藻（Anabaena Va-Kiabilis OL S1）、聚球藻（Synechococcus PCC 7310）和聚球藻（Synechococcus PCC 7003）三种蓝藻胞外分泌物的分离、提取和红细胞的溶血实验,结果表明鱼腥藻（A.Va-Kiabilis OL S1）能够分泌一种使新西兰兔红细胞溶解的溶血素,聚球藻S.PCC 7310和聚球藻S.PCC 7003分泌的溶血素活性很低;鱼腥藻溶血素为胞外分泌物,鱼腥藻在对数生长末期开始分泌溶血素,到稳定期毒素最多,在停滞期、对数前期均没有检测到溶血活性。 通过对鱼腥藻分泌溶血素理化条件的研究,结果表明溶血素分泌与鱼腥藻培养条件密切相关。鱼腥藻在24～35℃时溶血素分泌较多,溶血素分泌的最适温度范围为28～30℃,温度过高或过低均对溶血素的分泌有抑制作用;在正常光照范围内,随着光照强度的加大,藻类生长加快,藻类溶血素分泌也随之增多,但分泌量没有明显差别;pH在7～9之间时,藻类分泌溶血素含量高,pH<7及pH>9对鱼腥藻溶血素的分泌具有明显的抑制作用;添加氯霉素对鱼腥藻溶血素的分泌没有明显抑制作用,添加10～20μg/mL的甘油,能显著增加溶血素的分泌量。甘油是脂类合成的前体,实验过程中添加甘油后,鱼腥藻分泌毒素含量有所增加,由此推测该藻分泌的溶血素可能含有脂类结构,该溶血素可能不是蛋白质类溶血素。 本文通过对不同动物红细胞溶血作用研究发现,新西兰兔红细胞对鱼腥藻溶血素最敏感,大鼠和人红细胞次之,金鱼和猫血红细胞则对该毒素不敏感;鱼腥藻溶血素在0℃基本没有溶血活性,随着温度的升高,活性增强,并且产生溶血反应的停滞期也缩短;溶血活性随pH降低而升高,当pH=5.0时,基本达到阳

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一章 综述
• 1.1 蓝藻的生物学特征
• 1.1.1 蓝藻的分布及经济意义
• 1.1.2 蓝藻的分类
• 1.1.3 蓝藻的形态和结构
• 1.1.4 蓝藻的繁殖
• 1.1.5 色素及储藏物质
• 1.2 主要淡水蓝藻毒素的结构及毒性机理
• 1.2.1 肝毒素
• 1.2.2 神经毒素
• 1.2.3 其他毒素
• 1.3 蓝藻毒素的危害
• 1.4 藻类毒素的检测方法
• 1.4.1 生物检测法
• 1.4.2 理化检测法
• 1.4.3 免疫检测法
• 1.5 藻类溶血素研究进展
• 1.5.1 溶血素的定义及能产生溶血素的藻类
• 1.5.2 环境因子对藻类溶血素产生及活性的影响
• 1.5.3 溶血素的结构及生化特性
• 1.5.4 溶血素危害及其溶血作用机理
• 1.5.5 藻类溶血素研究展望
• 第二章 分泌溶血素蓝藻的筛选及其生物学特征
• 2.1 实验材料与仪器
• 2.1.1 实验藻种
• 2.1.2 实验药品
• 2.1.3 实验仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 实验蓝藻的培养
• 2.2.2 实验蓝藻生物量的测定方法
• 2.2.3 鱼腥藻不同生长阶段溶血素活性测定实验
• 2.2.4 蓝藻溶血素的提取
• 2.2.5 蓝藻溶血素活性的测定
• 2.3 结果与分析
• 2.3.1 三种蓝藻的生长期的确定
• 2.3.2 能分泌溶血素蓝藻的筛选
• 2.3.3 鱼腥藻的生物学特征
• 2.4 小结
• 第三章 不同理化条件对鱼腥藻溶血素分泌的影响
• 3.1 实验材料与仪器
• 3.1.1 实验藻种
• 3.1.2 实验药品
• 3.1.3 实验仪器
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 不同温度条件对鱼腥藻溶血素分泌的影响实验
• 3.2.2 不同光照条件对鱼腥藻溶血素分泌的影响实验
• 3.2.3 不同pH条件对鱼腥藻溶血素分泌的影响实验
• 3.2.4 添加氯霉素对鱼腥藻溶血素分泌的影响实验
• 3.2.5 添加甘油对鱼腥藻溶血素分泌的影响实验
• 3.2.6 藻类分泌溶血素活性的测定
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 不同温度条件对鱼腥藻溶血素分泌的影响
• 3.3.2 不同光照条件对鱼腥藻溶血素分泌的影响
• 3.3.3 不同pH条件对鱼腥藻溶血素分泌的影响
• 3.3.4 添加氯霉素对鱼腥藻溶血素分泌的影响
• 3.3.5 添加甘油对鱼腥藻溶血素分泌的影响
• 3.4 小结
• 第四章 鱼腥藻溶血素溶血图谱及溶血机理初步探讨
• 4.1 实验材料与仪器
• 4.1.1 实验藻种
• 4.1.2 实验药品
• 4.1.3 仪器设备
• 4.1.4 实验动物
• 4.2 实验方法
• 4.2.1 鱼腥藻溶血素粗提液的提取方法
• 4.2.2 实验动物血红细胞的制备方法
• 4.2.3 溶血图谱的绘制
• 4.2.4 不同温度对溶血活性的影响
• 4.2.5 不同pH值对溶血活性的影响
• 4.2.6 不同金属离子对溶血活性的影响
• 4.2.7 添加胆固醇、鞘磷脂和卵磷脂对溶血活性的影响
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 不同动物红细胞对溶血素的敏感试验
• 4.3.2 不同温度对溶血活性的影响
• 4.3.3 不同pH值对溶血活性的影响
• 4.3.4 不同金属离子对溶血活性的影响
• 4.3.5 添加胆固醇、鞘磷脂和卵磷脂对溶血活性的影响
• 4.4 小结
• 结论
• 参考文献
• 致谢