藻蓝蛋白对缺血再灌注大鼠脑保护作用的实验研究

论文摘要

[目的] 研究藻蓝蛋白对局灶脑缺血再灌注大鼠脑保护作用和机制。 [方法] 成年健康雄性Wistar大鼠60只,体重220260g。应用线栓法建立大脑中动脉闭塞（MCAO）再灌注动物模型,随机分为假手术组、对照组和治疗组,后两组再分为缺血1h再灌注6h、12h、1d、2d、3d、7d、14d七个观察时相点,每个时相点4只大鼠。治疗组于缺血再灌注后2h给于藻蓝蛋白（100mg/kg）灌胃治疗,对照组用等量的生理盐水同步灌胃。应用免疫组织化学技术检测各组大鼠脑组织核因子-κB（NF-κB）和白细胞介素-6（IL-6）表达,采用VIDAS显微图像分析系统进行图像定量分析。原位TUNEL技术检测神经细胞凋亡的变化规律,光镜下观察脑缺血区凋亡细胞数目。 [结果] 1.NF-κB表达:假手术组大鼠脑组织神经元和胶质细胞可微弱表达NF-κB,对照组皮质和纹状体区NF-κB表达,于脑缺血再灌注6h已开始增强,1d达高峰,持续24h～3d,7～14d恢复至假手术组水平。藻蓝蛋白组NF-κB表达,于脑缺血再灌注6h～3d较对照组显著下调,P<0.01。2.IL-6表达:假手术组大鼠脑组织神经元和胶质细胞可微弱表达IL-6,对照组皮质区和纹状体区IL-6表达的变化趋势与NF-κB相似,但其高峰出现在2d,较NF-κB略延迟,但持续时间较长,至14d降至假手术组水平。藻蓝蛋白组IL-6表达于脑缺血再灌注2h～7d较对照组显著下调,P<0.01。3、NF-κB与IL-6表达水平的相关分析:脑缺血再灌注损伤后,NF-κB的表达高峰在前,IL-6稍延迟,再灌注6h、12h、1d,NF-κB和IL-6表达水平逐渐升高,二者的变化呈显著性正相关,P<0.01。再灌注2d、7d、14d,二者呈逐渐下降的趋势,亦显著性正相关。P<0.01。4.细胞凋亡:光镜下观察TUNEL染色阳性细胞,假手术组可见到少量TUNEL阳性细胞。对照组皮质区和纹状体区TUNEL阳性细胞的变化趋势基本一致,于再灌注后6h凋亡细胞均已增加,皮质区先于1d达高峰,纹状体区2d达高峰,之后均逐渐下降,至14d接近基线水平。藻蓝蛋白组于再灌注6h～7d与对照组同时间点相比,凋亡细胞明显减少,P<0.05。 [结论] NF-κB与IL-6是脑缺血再灌注损伤炎症级联反应和细胞凋亡过程中重要的炎性细胞因子。藻蓝蛋白可能是通过下调NF-κB和IL-6的表达及抑制神经细胞的凋亡而发挥其神经保护作用。

论文目录

• 引言
• 材料与方法
• 结果
• 一、脑缺血再灌注后脑组织NF-κB的表达
• 二、脑缺血再灌注后脑组织IL-6的表达
• 三、NP-κB与IL-6表达水平的相关分析
• 四、细胞凋亡的检测
• 讨论
• 一、脑缺血再灌注损伤
• 二、脑缺再灌注损伤与神经细胞凋亡
• 三、脑缺血再灌注损伤的炎症机制
• 四、藻蓝蛋白的神经保护作用
• 结论
• 附图
• 参考文献
• 综述
• 综述参考文献
• 攻读学位期间的研究成果
• 致谢
• 声明