武晶晶:小鼠Na~+-K~+-2Cl~-共转运蛋白基因启动子克隆及20-HETE对其转录活性的影响论文

武晶晶:小鼠Na~+-K~+-2Cl~-共转运蛋白基因启动子克隆及20-HETE对其转录活性的影响论文

本文主要研究内容

作者武晶晶,孔令慧,贾茹(2019)在《小鼠Na~+-K~+-2Cl~-共转运蛋白基因启动子克隆及20-HETE对其转录活性的影响》一文中研究指出:目的克隆小鼠Na~+-K~+-2Cl~-共转运蛋白(Nkcc2)基因启动子序列,初步探讨20-HETE对该基因转录活性的调控作用。方法应用生物信息学软件ALiBaba2.1和TRANSFAC TESS分析小鼠Nkcc2基因启动子序列;以小鼠基因组DNA为模板,利用PCR方法扩增得到小鼠Nkcc2基因启动子区片段(-1 462 bp~+40 bp),并克隆入pGL3-Basic载体,构建萤光素酶报告基因载体;脂质体法将重组报告基因载体转染到HEK293T细胞24 h后,再以20-HETE处理转染细胞2 h,利用双萤光素酶报告基因检测系统分析萤光素酶活性。结果成功构建小鼠Nkcc2基因启动子萤光素酶报告基因载体;20-HETE可以显著下调小鼠Nkcc2基因启动子萤光素酶报告基因载体的转录活性。结论 20-HETE通过转录调控机制下调小鼠Nkcc2基因的表达。

Abstract

mu de ke long xiao shu Na~+-K~+-2Cl~-gong zhuai yun dan bai (Nkcc2)ji yin qi dong zi xu lie ,chu bu tan tao 20-HETEdui gai ji yin zhuai lu huo xing de diao kong zuo yong 。fang fa ying yong sheng wu xin xi xue ruan jian ALiBaba2.1he TRANSFAC TESSfen xi xiao shu Nkcc2ji yin qi dong zi xu lie ;yi xiao shu ji yin zu DNAwei mo ban ,li yong PCRfang fa kuo zeng de dao xiao shu Nkcc2ji yin qi dong zi ou pian duan (-1 462 bp~+40 bp),bing ke long ru pGL3-Basiczai ti ,gou jian ying guang su mei bao gao ji yin zai ti ;zhi zhi ti fa jiang chong zu bao gao ji yin zai ti zhuai ran dao HEK293Txi bao 24 hhou ,zai yi 20-HETEchu li zhuai ran xi bao 2 h,li yong shuang ying guang su mei bao gao ji yin jian ce ji tong fen xi ying guang su mei huo xing 。jie guo cheng gong gou jian xiao shu Nkcc2ji yin qi dong zi ying guang su mei bao gao ji yin zai ti ;20-HETEke yi xian zhe xia diao xiao shu Nkcc2ji yin qi dong zi ying guang su mei bao gao ji yin zai ti de zhuai lu huo xing 。jie lun 20-HETEtong guo zhuai lu diao kong ji zhi xia diao xiao shu Nkcc2ji yin de biao da 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自中国医科大学学报的武晶晶,孔令慧,贾茹,发表于刊物中国医科大学学报2019年01期论文,是一篇关于共转运蛋白论文,启动子论文,基因克隆论文,中国医科大学学报2019年01期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中国医科大学学报2019年01期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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