忍冬种质资源调查及遗传多样性的初步研究

论文摘要

目的:在忍冬种质资源调查的基础上对忍冬种质资源的遗传多样性和亲缘关系进行初步研究。方法:采用形态分类法对不同忍冬种质的形态特征进行观察描述;用AFLP分子标记对13个忍冬种质进行分析,利用DPS V3.01软件计算各种质的遗传距离,按类平均法(UPGMA)进行聚类分析。结果:忍冬种质间存在明显的形态差异。首次建立了适合忍冬的AFLP银染技术体系。从64对引物组合中筛选得到6对引物的扩增片段具有丰富的多态性,共获得435条扩增带,其中191条具有多态性,平均多态检出率为43.9%,各种质间遗传距离的变化范围在0.0170～0.7143之间。系统树图显示,13个种质可按地域性分为山东与河南新密两大类,同一道地产区栽培种质的亲缘关系较近,山东种质又分为四大组,结果与形态分类结果基本一致。结论:形态差异是划分忍冬种质的重要宏观依据。AFLP分子标记揭示了忍冬种内存在丰富的遗传多样性和种质间的亲缘关系,为忍冬的种质鉴定和品种选育提供了分子水平的理论依据。

论文目录

• 提要
• Abstract
• 引言
• 第一章 文献综述
• 1 药用植物种质资源概述
• 1.1 药用植物种质资源的概念
• 1.2 种质资源影响中药材质量的内在机理
• 1.3 药用植物种质资源研究的特点
• 2 忍冬种质资源的研究概况
• 2.1 忍冬植物形态与生物学特性
• 2.2 忍冬种质资源的研究
• 2.3 忍冬种质资源研究中存在的问题
• 2.4 忍冬种质资源研究的前景展望
• 3 DNA 分子标记技术研究进展
• 3.1 DNA 分子标记技术的特点
• 3.2 DNA 分子标记技术的分类
• 3.3 几种常用的DNA 分子标记技术
• 3.4 AFLP 技术及其在药用植物研究中的应用
• 第二章 忍冬种质资源的调查与鉴定
• 1 调查方法与调查路线
• 2 金银花道地产区及其产况
• 3 道地产区主要忍冬种质资源
• 4 小结与讨论
• 第三章 忍冬不同种质的形态比较
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 2 结果与分析
• 3 小结与讨论
• 3.1 忍冬不同种质的形态鉴别依据
• 3.2 忍冬不同种质形态鉴别
• 3.3 忍冬13 个不同种质形态鉴别检索表
• 第四章 忍冬种质资源遗传多样性的AFLP 分析
• 第一节 忍冬基因组DNA 提取方法的研究
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 仪器与试剂
• 1.3 方法
• 1.4 DNA 质量鉴定
• 2 结果与分析
• 2.1 产率及纯度检测
• 2.2 电泳检测
• 2.3 酶切检测
• 3 小结与讨论
• 3.1 忍冬干叶中DNA 提取方法的改进
• 3.2 改良CTAB 法提取不同材料的效果比较
• 3.3 DNA 质量检测方法的改进
• 第二节 忍冬AFLP 银染技术体系的建立与优化
• 1 材料与方法
• 1.1 材料同第一节1.1
• 1.2 仪器与试剂
• 1.3 方法
• 2 结果与分析
• 2.1 模板DNA 的质量
• 2.2 酶切体系
• 2.3 连接时间
• 2.4 预扩体系
• 2.5 选扩体系
• 2.6 聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染
• 3 小结与讨论
• 3.1 AFLP-PCR 技术体系的建立
• 3.2 制胶影响因素
• 3.3 电泳影响因素
• 3.4 关于银染技术的讨论
• 3.5 试剂方面的影响
• 第三节 忍冬种质资源的遗传多样性分析
• 1 材料与方法
• 1.1 材料同第一节1.1
• 1.2 仪器与试剂同第二节1.2
• 1.3 方法
• 2 结果与分析
• 2.1 扩增产物的多态性
• 2.2 遗传距离分析
• 2.3 聚类分析
• 3 小结与讨论
• 3.1 引物筛选的意义
• 3.2 聚类结果与地理环境的关系
• 3.3 山东忍冬种质的遗传多样性
• 3.4 忍冬的遗传多样性与品种选育的关系
• 3.5 研究中存在的问题和前景展望
• 结语
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 查新报告