论文摘要
目的 1 建立DM大鼠模型,优化AR活性荧光测定法的条件并动态观察DM大鼠AR活性的变化。 2 检测DM大鼠肾脏AR、Bax/Bcl-2、PPARγ的基因表达情况,进一步分析三者基因表达变化的内在联系,探讨它们与DN发病机理的关系。 方法 1 优化AR活性的荧光测定法,并动态观察DM大鼠AR活性。 1.1 用STZ复制DM大鼠模型,并按病程分为DM20、40、60d组。 1.2 比较测定AR活性的两种荧光法(NADP生成法和NADPH减少法)的灵敏度和重复性。 1.3 选择其中较优的一种方法进一步观察血红蛋白对荧光是否有影响。 1.4 将AR活性的荧光测定法进行优化。 1.5 应用优化后的荧光法动态观察DM大鼠红细胞及肾脏AR活性。 2 AR、Bax/Bcl-2、PPARγ基因表达的变化及其与DN关系的探讨。 2.1 PAS染色观察DM大鼠组织切片。 2.2 RT-PCR法检测AR、Bax/Bcl-2以及PPARγ的基因表达情况。 2.3 Northern Blot进一步证实上述基因在不同组间表达的变化。 2.4 分析这些基因表达变化的相关性,探讨它们与DN发病机理的关系。 结果 1.1 NADP生成法测定AR活性的灵敏度高、重复性好。 1.2 血红蛋白对荧光有影响,高氯酸将其沉淀后可消除这种影响。
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