歧黄消痛方对兔膝骨关节病作用机制的探讨

论文摘要

目的 骨关节病是多发于中年以后的慢性、进行性疾病,常见症状为受累关节疼痛,活动加重,休息后缓解,久不活动有僵硬感以及骨肥大等。本病归属于中医“痹症”范畴,是临床常见病,其发病率,对病人生活质量的影响不能低估,对社会生产力的影响和由此产生的经济负担也很惊人。因此,探求其发病机理有重要的临床和科研意义。本实验通过模拟人类骨关节病复制出实验兔膝骨关节病模型,采用不同剂量的歧黄消痛方进行治疗,并以疗效肯定的芬必得作为阳性对照组,检测兔血清相关指标,同时对关节软骨及滑膜作免疫组化病理切片分析,初步明确该方对膝关节病的作用机理,为该方治疗膝骨关节病的临床合理用药提供科学的理论依据。我们本着中医的补肾壮骨,活血止痛,舒风通络的治疗原则,用歧黄消痛方中药治疗。检测相关指标来探讨歧黄消痛方对骨关节病的作用机理。为深入研究提供实验依据。 方法 采用随机、双盲、平行对照的方法将30只4～10月龄健康新西兰大白兔分为五个组,每组六只,正常组（A）、模型组（B）、中剂量组（C）、高剂量组（D）、阳性组（E）。按照日本康彦等标准造模方法,在兔膝骨关节腔内注射1.6%木瓜蛋白酶0.5ml,分别于实验的第1、4、7日注入兔膝关节中,连续注射3次。建立骨关节病模型,于末次注射后3天灌胃,A、B组给予灌服生理盐水15ml,C、D分别给予中药灌胃,按人兔折算后给予中剂量组5.9 g*kg-1d-1、高剂量组11.8g*kg-1d-1,E组给予以纯蒸馏水制成4mg*m1-1浓度的芬比得混悬液15ml。给药6周后用50ml注射器心脏采血,离心后取动物血清,取血后处死动物取膝关节软骨及滑膜。检测血清中一氧化氮（NO）的含量,超氧化物歧化酶（SOD）的活性,透明质酸（HA）的含量,利用免疫组化染色及图象分析测定关节软骨及滑膜中TGF-β1表达强度。 结果 1.歧黄消痛方高中剂量组均能较显著改善兔膝关节病的膝关节功能活动,芬必得组也能较明显的改善兔膝骨关节病的膝关节功能活动。 2.模型组血清NO含量高于正常组,歧黄消痛方可降低血清NO水平,中药中、高剂量及阳性组与模型组有显著性差异（P<0.01）,中药中、高剂量组与阳性组无明显差异（P>0.05）。 3.模型组血清SOD活性显著降低,歧黄消痛方能提高血清中SOD活性,中药中剂量组作用优于阳性组（P<0.05）,中药中剂量组与中药高剂量组对于提高兔血清中SOD的活性无显著性差异。 4.模型组血清HA含量显著高于正常组（P<0.01）,歧黄消痛方可显著降低血清HA水平,中药中剂量组与中药高剂量组有明显差异（P<0.01）,高剂量组优于中剂量组,中药高剂量组与阳性组无显著性差异（P>0.05）。 5.模型组关节软骨及滑膜中TGF-β1表达强度显著低于正常组（P<0.01）,歧黄消痛方可明显提高关节软骨及滑膜TGF-β1表达强度,对提高平均光密度中药中剂量组与中药高剂量组之间有明显差异（P<0.05）,高剂量组优于中剂量湖北中医学院2002级硕士研究生论文 组,中剂量组与阳性组比较无显著性差异（P>0 .05）,对提高积分光密度中药 中、高剂量组与阳性组比较无显著性差异（P>0 .05）。6.歧黄消痛方可使兔膝骨关节病的病理形态学及超微结构发生改变。结论 歧黄消痛方对膝骨关节病有很好的治疗作用,且其综合作用优于临床常用的芬必得西药组。实验结果表明,歧黄消痛方可通过调节血管舒张因子、减轻自由基损伤、降低血清透明质酸、增强关节软骨及滑膜中转化生长因子的表达而达到治疗膝关节病的作用。主题词:骨关节病机制中医药治疗动物实验疗效

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 实验部分
• 1 材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 实验药物
• 1.3 实验试剂
• 1.4 实验仪器
• 2 方法
• 2.1 动物饲养
• 2.2 动物分组
• 2.3 动物造模
• 2.4 给药方法
• 2.5 取材方法
• 3 检测指标
• 3.1 一氧化氮的测定
• 3.2 超氧化物歧化酶的测定
• 3.3 透明质酸的测定
• 3.4 β转化生长因子的测定
• 4 数据处理与统计学检验
• 5 结果
• 6 讨论
• 6.1 动物模型的选择
• 6.2 中医对骨关节病的认识
• 6.3 歧黄消痛方的组方原理
• 6.4 歧黄消痛方对兔膝骨关节病的作用机制
• 7 问题与展望
• 参考文献
• 文献综述
• 参考文献
• 致谢
• 附图