论文摘要
目的:通过研究中药复方当归注射液（Angelicasinensis（Oliv）Diels compound injection）、麻黄碱（Ephedrine）、马钱子碱（Vauqueline）、士的宁（Strychnine）对人白血病多药耐药细胞株K562/A02 MDR1（multidrug resistance 1）、MRP（multidrug resistance-associated protein）、TopoⅡ（topoisomeraseⅡ）、GST-π（glutathione s-transferase）基因及其蛋白表达的影响,探讨上述四种中药对K562/A02细胞多药耐药的逆转途径。研究对象:人白血病耐药细胞株:K562/A02细胞方法:采用台盼蓝拒染法检测复方当归注射液的细胞毒作用及噻唑蓝（MTT）法检测麻黄碱、马钱子碱、士的宁的细胞毒作用;采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫印迹（Western Blot）分别检测上述四种中药在非细胞毒浓度（IC10）作用下对K562/A02细胞MDR1、MRP、TopoⅡ、GST-πmRNA及其蛋白表达的影响。结果:1、非细胞毒浓度（IC10）的复方当归注射液、麻黄碱、马钱子碱作用后,K562/A02细胞MDR1 mRNA及P-gp表达下降（P<0.01）;而士的宁作用后K562/A02细胞MDR1 mRNA及P-gp表达无明显变化（P>0.05）。2、非细胞毒浓度（IC10）的复方当归注射液作用后,K562/A02细胞MRP、TopoⅡ、GST-πmRNA表达无明显变化（P>0.05）;TopoⅡ蛋白表达增加（P<0.01）,MRP、GST-π蛋白表达无明显变化（P>0.05）。非细胞毒浓度（IC10）的士的宁作用后K562/A02细胞MRP mRNA及其蛋白表达下降（P<0.01）,TopoⅡ、GST-πmRNA及其蛋白表达无明显变化（P>0.05）。非细胞毒浓度（IC10）的麻黄碱、马钱子碱作用后K562/A02细胞MRP、TopoⅡ、GST-πmRNA及其蛋白表达无明显变化（P>0.05）。结论:1、非细胞毒浓度（IC10）的复方当归注射液、麻黄碱、马钱子碱均可部分逆转K562/A02细胞的耐药性,其作用途径可能与下调K562/A02细胞MDR1 mRNA的表达,导致细胞膜上P-gp的表达量减少有关;而非细胞毒浓度（IC10）的士的宁对K562/A02细胞MDR1 mRNA及P-gp的表达无明显影响。2、非细胞毒浓度（IC10）的复方当归注射液可通过上调TopoⅡ蛋白的表达部分逆转K562/A02细胞的耐药性,而对TopoⅡmRNA表达水平无影响;且其对K562/A02细胞MRP、GST-πmRNA及其蛋白的表达无明显影响。非细胞毒浓度（IC10）的士的宁可通过下调MRP mRNA及其蛋白的表达部分逆转K562/A02细胞的耐药性,而对TopoⅡ、GST-πmRNA及其蛋白的表达无明显影响。非细胞毒浓度（IC10）的麻黄碱、马钱子碱对K562/A02细胞MRP、TopoⅡ、GST-πmRNA及其蛋白的表达无明显影响。
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