论文题目: 动粒蛋白mitosin在有丝分裂过程中的功能
论文类型: 博士论文
论文专业: 细胞生物学
作者: 杨振业
导师: 朱学良
关键词: 有丝分裂,动粒,纺锤体,马达分子,检查点
文献来源: 中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）
发表年度: 2005
论文摘要: Mitosin(CENP-F)是350kDa 的人源核蛋白,在有丝分裂期会定位到动粒(kinetochore)的外层。以前的研究已经对mitosin 的表达、分布有了详细的认识,并且有结果表明mitosin 在有丝分裂进程中发挥作用,但是对于mitosin 的确切功能以及具体参与的过程和通路还知道得很少。在这份工作中,我们首先进一步确证了原代培养细胞中的mitosin以及mitosin在哺乳动物中的直系物(ortholog)都是动粒蛋白,接下来对mitosin 的功能进行了细致的分析。利用RNA 干扰和激光共聚焦显微镜扫描以及活体细胞拍摄技术,我们发现mitosin 在有丝分裂过程中有多种重要的功能。在去除mitosin 的细胞内,染色体在进入有丝分裂后向赤道板汇聚的速度减慢,部分染色体始终不能排列到赤道板上,细胞阻滞在假中期的状态。两极附近染色体的动粒与微管束错误结合的比例很高。缺失mitosin 会造成纺锤体扭曲变形,出现长的穿过赤道板的微管束。冷处理去除非动粒微管发现,位于两极的染色体,其动粒与微管束的结合是不稳定的,而位于赤道板上的染色体与动粒微管束结合的稳定性不受影响。一部分染色体即使汇聚到赤道板上,但其动粒排列是混乱的,不能沿纺锤体轴正确定向,说明也没有建立正确的动粒与微管的两极结合。抑制mitosin 表达还造成姐妹动粒之间的张力平均降低了53%。Mitosin 缺失造成的表型都暗示控制微管与动粒结合以及染色体运动的动粒马达分子的功能有缺陷,并且这些表型与马达类分子CENP-E 缺失引起的表型很相似。所以进一步的研究发现缺少mitosin,马达分子复合体dynein/dynactin 和CENP-E 在动粒上的定位明显的减弱,这种减弱是微管依赖的过程。缺失mitosin细胞中,dynactin 和CENP-E 在微管结合之后很容易从动粒上解离。活细胞拍摄实验还显示缺失mitosin 的分裂期细胞阻滞在假中期约2 小时后,会在后期启动前进入凋亡。这些凋亡细胞会呈现出不同程度上的染色体臂解凝集,此时的动粒还与纺锤体的微管结合。我们还注意到在去除mitosin 的细胞中,有不到20%的细胞可以进入分裂中期,即染色体都排列到赤道板上,但其中一部分依然不能启
论文目录:
引言
实验材料和方法
实验结果
讨论
结论
总结和体会
综述
参考文献
发表文章目录
致谢
发布时间: 2005-09-09
参考文献
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