论文摘要
为了研究生长抑素(SS)对大鼠乳腺发育的调节作用,本论文以处女期、妊娠6 d,12 d,18 d和泌乳6 d,12 d,18 d的SD大鼠为研究对象,用免疫组化法、RT-PCR法、放射免疫法及酶联免疫相结合的方法,分别研究了乳腺中SS的分布及表达、乳腺发育过程中SS的变化规律和SS与乳腺发育相关因子的关系,并通过SS及其耗竭剂来佐证SS对乳腺发育的调节作用。主要结果如下:1.用免疫组化和RT-PCR法研究了乳腺中SS的分布及表达。结果显示,处女期、妊娠6 d,12 d,18 d和泌乳6 d,12 d,18 d大鼠乳腺上皮细胞的胞质和腺泡分泌物中均出现SS阳性免疫反应;不同发育期大鼠乳腺组织中均有SS mRNA表达。2.乳腺中SS含量变化与乳腺发育的相关关系研究发现,乳腺中SS含量随乳腺的发育而减少。放射免疫法结果显示,处女期SS含量最高,妊娠期和泌乳期的SS含量依次递减。ELISA法结果显示,妊娠6 d的SS含量略高于处女期(P>0.05),与泌乳期各组相比差异显著(P<0.05);泌乳期SS含量在12 d略有升高,泌乳期各组间相比差异不显著(P>0.05)。3.用放射免疫和RT-PCR法研究了SS与乳腺发育相关因子的相关关系,结果发现:3.1血清E2水平以处女期最高,妊娠期保持在较低水平,泌乳期开始升高;乳腺E2水平在处女期为12.36 pg/mg组织蛋白,妊娠过程中持续降低,分娩后急剧升高,泌乳期呈下降趋势;ERαmRNA在处女期、妊娠和泌乳期大鼠乳腺中均有表达,ERαmRNA的转录水平随乳腺的发育而降低,但第12 d升高且与第18 d差异显著。表明SS对乳腺ERα基因的表达有双重调节作用。妊娠期上调乳腺ERαmRNA基因的表达,泌乳期起下调作用,且通过上调或下调血清和乳腺E2水平参与乳腺细胞发育和泌乳。3.2血清P4水平以处女期最低,妊娠过程中渐渐升高,分娩后显著降低,泌乳期呈先升高后下降的变化模式;乳腺P4水平随乳腺的发育而降低。PR mRNA在处女期、妊娠期和泌乳期大鼠乳腺中均有表达,处女期PR mRNA的转录水平最高,分娩后开始下降,至泌乳6 d时检测不到PR mRNA表达,泌乳12 d和泌乳18 d可检测到PR mRNA表达。表明SS对乳腺PR基因的表达和血清P4水平有双重调节作用。妊娠期上调乳腺PR基因的表达,泌乳期起下调作用;妊娠期和泌乳中期下调血清P4水平,泌乳早期和晚期起上调作用。SS在妊娠和泌乳期对乳腺P4水平均有上调作用。3.3血清GH水平以处女期最低,妊娠过程中渐渐升高,分娩后急剧下降,泌乳期变化不明显;乳腺GH水平以处女期最高,妊娠过程中呈下降趋势,分娩后显著升高,泌乳期呈下降趋势;妊娠和泌乳期的GHR mRNA转录水平与处女期相比略有降低乳
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