CpG ODN增效重组口蹄疫病毒疫苗的研究

论文摘要

猪O型口蹄疫（Foot and mouth disease,FMD）是一种高度传染性的疾病,接种疫苗是预防FMDV（Foot-and-mouth disease virus,FMDV）的主要方法。为了增强FMDV疫苗的免疫效果,通常在疫苗中加入各种佐剂。CpG ODN是以非甲基化的胞嘧啶和鸟嘌呤核苷酸（CpG）为核心的寡聚脱氧核苷酸,具有强烈的免疫激活功能。B型和C型CpG ODN可以刺激B细胞的增殖分化及抗体的生成。为了探索CpG ODN能否成为重组口蹄疫病毒疫苗新型佐剂的可能性,采用重组猪O型口蹄疫病毒VP1蛋白疫苗（重组VP1蛋白疫苗）,研究了自行设计的新型CpG F1的分子佐剂功能,结果表明:CpG F1联合206油佐剂（Montanide ISA 206）增效重组VP1蛋白疫苗免疫原性的过程中,两种佐剂联合没有产生协同作用,CpG F1降低了206油佐剂对重组VP1蛋白疫苗的佐剂效应。上述结果表明,CpG F1能否成为重组VP1蛋白疫苗的理想佐剂还有待于进一步探讨。

论文目录

• 提要
• 引言
• 材料与方法
• 1. 主要材料与试剂
• 1.1 主要材料
• 1.1.1 实验动物
• 1.1.2 CpG ODN
• 1.1.3 重组VP1 蛋白
• 1.2 主要试剂
• 1.2.1 206 油佐剂
• 1.2.2 ELISA 抗体及抗原
• 1.2.3 ELISA 试剂
• 1.3 其它试剂
• 1.4 主要实验设备
• 2. 主要方法
• 2.1 体外最佳CpG ODN 的筛选
• 2.1.1 细胞计数
• 2.1.2 淋巴细胞增殖反应的测定（H-TdR 掺入法）
• 2.2 实验动物的免疫接种
• 2.3 ELISA 法检测抗体水平方法的建立
• 实验结果
• 1. 最佳 CPG ODN 的筛选
• 1.1 CpG ODN 刺激猪PBMC 增生
• 1.2 CpG ODN 刺激豚鼠脾细胞增生
• 2.C PG F1 与206 油佐剂作为重组VP1 蛋白疫苗佐剂的作用
• 2.1 CpG F1 的纯度分析
• 2.2 重组VP1 蛋白的鉴定
• 2.3 ELISA 法检测中包板的重组VP1 蛋白特异性鉴定
• 2.4 CpG F1 与206 油作为重组VP1 蛋白疫苗佐剂刺激豚鼠产生抗体的作用
• 3. 体外观察CPG F1 联合206 油佐剂的相互作用
• 3.1 CpG－F1 和206 油对细胞形态的影响
• 3.2 CpG－F1 与206 油作用后细胞计数结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 中文摘要
• ABSTRACT
• 致谢