多壁碳纳米管在线提取蛋清溶菌酶的研究

多壁碳纳米管在线提取蛋清溶菌酶的研究

论文摘要

溶菌酶是一种专门作用于微生物细胞壁的水解酶,广泛应用于食品工业、包装工业、医学临床及生物工程中。随着各种新的生物分离技术的出现,用于溶菌酶分离纯化的方法也愈来愈多,从传统的结晶法、沉淀法、色谱法、离子交换法,到现在采用的新技术如亲和膜色谱、反胶团萃取、双水相萃取等。其中固相萃取法具有回收率高、有机溶剂消耗少、富集倍率高、操作简单、省时、省力、易于自动化等优点,是最常使用的提取蛋清溶菌酶的方法。溶菌酶是蛋清主要蛋白质中唯一一种碱性蛋白质,在水溶液中带正电荷;碳纳米管经氧化处理后,在水溶液中其表面带负电荷;基于物质之间电荷的相互作用,本文建立了多壁碳纳米管在线提取蛋清中溶菌酶的新方法。将经适当纯化处理后的碳纳米管装入自制的固相萃取柱,对蛋清中溶菌酶进行选择性吸附后,用碳酸盐缓冲溶液进行定量洗脱。本文在顺序注射系统中,对洗脱剂、洗脱剂的pH以及富集流速、洗脱流速、洗脱剂体积等实验参数进行了优化选择,并考察了洗脱剂的离子强度对洗脱结果的影响。实验结果表明,多壁碳纳米管微柱可以有效的定量萃取溶菌酶,富集倍率为12,试样处理量为10个h-1。对实际样品鸡蛋清进行提取,得到电泳纯度为100%的溶菌酶,100 mL鸡蛋清可提取溶菌酶0.40 g。若蛋清中所含蛋白质按13%计算,该方法所提取的溶菌酶占蛋清中蛋白质总量的3.6%,与标准值相符。与其它提取蛋清溶菌酶的方法相比较,本法具有试剂用量少、提取速度快等优点。此外,由于引用了顺序注射这种在非平衡状态下快速进样的分析技术,使得该法还具有在线、微量、密闭、自动等优点。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 第1章 概述
  • 1.1 溶菌酶的性质
  • 1.2 溶菌酶的应用
  • 1.2.1 在食品工业中的应用
  • 1.2.2 在包装工业中的应用
  • 1.2.3 在医学上的应用
  • 1.2.4 在生物工程上的应用
  • 1.2.5 在环境工程上的应用
  • 1.2.6 在发酵工业上的应用
  • 1.2.7 在饲料中的应用
  • 1.3 溶菌酶的提取方法
  • 1.3.1 结晶法
  • 1.3.2 离子交换法
  • 1.3.3 色谱技术
  • 1.3.4 膜分离技术
  • 1.3.5 利用亲和作用进行纯化的方法
  • 1.3.6 其他分离纯化技术
  • 1.4 固相萃取中常用的吸附剂
  • 1.4.1 树脂
  • 1.4.2 纤维类
  • 1.4.3 硅胶、可控孔玻璃
  • 1.4.4 活性氧化铝
  • 1.4.5 活性碳类吸附剂
  • 1.4.6 生物富集剂
  • 1.4.7 纳米材料—碳纳米管
  • 第2章 多壁碳纳米管在线提取溶菌酶
  • 2.1 实验部分
  • 2.1.1 仪器
  • 2.1.2 试剂及配制
  • 2.1.2.1 试剂
  • 2.1.2.2 溶液的配制
  • 2.1.3 微型离子交换柱的制备
  • 2.1.3.1 碳纳米管的预处理
  • 2.1.3.2 装柱
  • 2.1.4 实验原理
  • 2.1.5 实验流路及操作过程
  • 2.1.6 溶菌酶的定量
  • 2.2 结果与讨论
  • 2.2.1 方法研究
  • 2.2.2 萃取条件的选择
  • 2.3 分析性能
  • 2.3.1 标准曲线
  • 2.3.2 检出限
  • 2.3.3 精密度
  • 2.4 本章小结
  • 第3章 蛋清中溶菌酶的提取
  • 3.1 蛋清的预处理
  • 3.1.1 等电点沉淀法
  • 3.1.2 处理步骤
  • 3.2 蛋清中溶菌酶的在线提取
  • 3.3 溶菌酶纯度的检验
  • 3.3.1 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)相关试剂的配制
  • 3.3.2 夹心式垂直电泳系统
  • 3.3.3 SDS-PAGE凝胶的配制及凝胶板的制备
  • 3.3.4 样品的处理、加样及电泳
  • 3.3.5 凝胶的剥离、染色及脱色
  • 3.4 溶菌酶活性检测
  • 3.4.1 溶壁微球菌的培养
  • 3.4.2 溶菌酶活性测定
  • 3.5 本章小结
  • 第4章 结论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 攻读学位期间发表的论文
  • 相关论文文献

    • [1].咸蛋清资源化综合利用的研究[J]. 农产品加工 2020(05)
    • [2].蛋清蛋白质的功能特性及改性方法的研究进展[J]. 农产品加工 2020(19)
    • [3].咸鸭蛋快速腌制工艺及咸蛋清综合利用研究进展[J]. 食品与机械 2020(10)
    • [4].蛋清能去除衣服上的口香糖吗?[J]. 植物医生 2017(04)
    • [5].咸蛋清脱盐和蛋白回收的研究现状[J]. 北京农业 2014(36)
    • [6].炒肉片加点蛋清[J]. 百姓生活 2013(01)
    • [7].蛋清能护发[J]. 意林(少年版) 2011(09)
    • [8].碱诱导鸭蛋蛋清凝胶特性的变化规律[J]. 食品与机械 2020(03)
    • [9].基于蛋清分离器的浇口分析[J]. 山东工业技术 2016(24)
    • [10].利用低场核磁共振技术研究二氧化碳气调贮藏下蛋清水分变化[J]. 食品工业科技 2017(02)
    • [11].巧治烫伤[J]. 中国民间疗法 2011(04)
    • [12].蛋清肽的抗氧化稳定性与功能特性[J]. 食品科学 2011(15)
    • [13].新型功能性蛋制品蛋清溶菌酶漱口水[J]. 中国农村科技 2020(04)
    • [14].古代三合土灰浆中蛋清的酶联免疫检测研究[J]. 建筑材料学报 2015(04)
    • [15].不同淀粉对蛋清浆的影响研究[J]. 园艺与种苗 2015(10)
    • [16].鸡蛋壳与蛋清的综合应用研究进展[J]. 上海畜牧兽医通讯 2014(01)
    • [17].蛋清肽的制备及其对保加利亚乳杆菌促生长的作用[J]. 食品科学 2014(07)
    • [18].蛋清肽的工艺优化、抗氧化作用及特性[J]. 食品与生物技术学报 2013(08)
    • [19].咸蛋清蛋白质的絮凝与脱盐研究[J]. 食品工业科技 2012(20)
    • [20].蛋清抽取量和蛋壳钙质开孔对X期鸡胚发育的影响[J]. 畜牧兽医科技信息 2012(12)
    • [21].基于感应方法的咸蛋清盐分分析[J]. 中国食品学报 2016(10)
    • [22].紫外辐照法提高咸蛋清起泡性的工艺研究[J]. 食品工业科技 2013(10)
    • [23].蛋清糊物理特性及其对油炸猪肉片品质的影响[J]. 肉类研究 2011(10)
    • [24].蛋清蛋白质降压肽的化学及酶稳定性研究[J]. 食品科学 2010(09)
    • [25].蛋清肠制作技术[J]. 农产品加工 2010(11)
    • [26].温度对蛋清碱诱导凝胶形成的影响及机理研究[J]. 食品工业 2017(12)
    • [27].利用肽配体库分析蛋清中低丰度蛋白质组[J]. 分析测试学报 2015(11)
    • [28].一个中医MM的保养经[J]. 祝你幸福(午后) 2009(07)
    • [29].蛋清的别样用法[J]. 健康生活(下半月) 2011(11)
    • [30].蛋清蛋黄分离器[J]. 青少年科技博览(中学版) 2008(Z1)

    标签:;  ;  ;  ;  

    多壁碳纳米管在线提取蛋清溶菌酶的研究
    下载Doc文档

    猜你喜欢