糖尿病大鼠肺泡巨噬细胞功能变化及胰岛素治疗的影响

论文摘要

前言肺脏作为糖尿病损害的靶器官本世纪70年代以来才逐渐被大家关注，广泛涉及肺功能、生化代谢、肺组织病理等诸多方面，其中肺局部防御功能降低所致下呼吸道感染最为常见。以前研究表明各种细菌病毒及其它病原体引起肺炎发病率及死亡率增加的相关危险因素。肺泡巨噬细胞广泛分布于肺泡内及支气管表面，是肺组织接触抗原最早机会最多的免疫细胞，组成肺组织的第一道防线，能够比其他细胞更有效地清除细菌、病毒、真菌感染．作为组织特异性的肺泡巨噬细胞其变化的具体机制目前尚不清楚，本文复制糖尿病动物模型，通过支气管肺泡灌洗直接获得肺泡巨噬细胞观察不同病程中其吞噬及释放细胞因子IL-1β、IL-12、TNF-α及NO功能变化，进一步观察胰岛素治疗及体外高糖环境对其影响。因此从细胞及分子生物学水平探讨糖尿病肺防御功能减弱的发生机制，为糖尿病肺感染的发生、发展规律及其防治提供依据。材料与方法1、材料链脲左菌素，大鼠白介素1β（IL-1β）、白介素12（IL-12）肿瘤坏死因子（TNF-α）酶联免疫吸附测定试剂盒，NO测定试剂盒，中效重组人胰岛素，血糖仪。2、方法动物分组及糖尿病模型的建立：将60只雄性健康wistar大鼠，体重200克左右，随机分为5组（每组12只），正常对照组，糖尿病4周组、8周组、胰岛素治疗组及体外高糖组。动物禁食16小时，按60mg/kg体重一次性腹腔注射冰浴下新鲜配制的2％STZ枸橼酸-枸橼酸钠缓冲溶液，正常对照组以枸橼酸-枸橼酸钠缓冲溶液代替STZ，体外高糖组动物不予特殊处理直接行支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞，各种处置均所用含葡萄糖糖30mmol/l RPMI 1640培养液。肺泡巨噬细胞的获取及培养：大鼠用10％水合氯醛麻醉成功后，行气管插管，经气管插管行支气管肺泡灌洗（BAL），共5ml×6，回收BALF，贴壁培养2小时，得纯化AM；AM吞噬功能以其对鸡红细胞吞噬率表示。ELISA法进行IL-1β、IL-12、TNF-α检测；Griess法进行NO的检测；统计学处理：采用SPSS11.5软件统计，各组检测结果均以（?）±s表示，各组比较采用方差分析或非参数检验（方差齐时采用方差分析，当方差不齐时采用非参数检验），各组组间两两比较采用DUNNETT-t法，各组吞噬率比较采用非参数检验，P<0.05为差异有统计学意义。实验结果糖尿病4周组、8周组大鼠肺泡巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率（7.25±2.49％、5.25±1.83％）显著低于正常对照组（9.63±2.20％，P<0.01）；糖尿病4周组肺泡巨噬细胞体外培养液IL-12量（59.48±2.08pg/ml）较正常对照组显著减少（76.43±1.18pg/ml，P<0.01）；糖尿病8周组IL-12、TNF-α（67.21±2.01pg/ml、350.29±70.10pg/ml）较对照组显著减少（76.43±1.18pg/ml、475.72±92.6pg/ml，P均<0.05）；糖尿病8周组IL-1β（96.21±8.32pg/ml）较正常对照组显著升高（77.29±6.41 pg/ml，P<0.01），糖尿病4周组、糖尿病8周组NO量（32.46±3.16μM、28.57±4.73μM）显著高于正常对照组（5.50±0.63μM，P均<0.01）。胰岛素治疗能减弱上述变化趋势，但无统计学差异。结论1、糖尿病大鼠肺泡巨噬细胞对鸡血红细胞的吞噬率下降，并随病程的延长其吞噬率下降明显，差别有统计学意义。2、糖尿病大鼠肺泡巨噬细胞体外培养释放IL-12、TNF-α量减少。3、糖尿病大鼠肺泡巨噬细胞体外培养释放IL-1β、NO量增加。4、胰岛素治疗有逆转上述变化趋势但差别无统计学意义。5、单纯体外高糖与糖尿病组有相同变化趋势但前者变化无后者显著。

论文目录

• 一、摘要
• 中文论著摘要
• 英文论著摘要
• 二、英文缩略语
• 三、论文
• 前言
• 材料与方法
• 实验结果
• 讨论
• 结论
• 四、本研究创新性的自我评价
• 五、参考文献
• 六、附录
• 综述
• 在学期间科研成绩
• 致谢
• 个人简介