肠复康对人大肠癌细胞凋亡影响的实验研究

论文摘要

目的:研究中药复方制剂肠复康对人大肠癌细胞凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。 方法:（1）以人结肠癌细胞株LoVo在BALB/C-nu/nu裸鼠皮下注射建立人大肠癌HT-29裸鼠移植瘤模型。（2）设立肠复康低、中、高剂量组和空白对照组、5-fu+CF阳性对照组。（3）采用免疫组化、光镜结合图象分析技术定量检测并比较各组移植瘤凋亡细胞数、bcl-2、caspase-3、TGF-β、Bax的表达情况。（4）统计分析实验数据,探讨中药复方制剂肠复康对人大肠癌细胞凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。 结果:通过凋亡细胞检测发现,各用药组移植瘤凋亡细胞数均较空白组增多,其中肠复康中、高剂量组移植瘤凋亡细胞数显著多于空白组及5-fu+CF化疗组（P均<0.01）。表明肠复康对人大肠癌HT-29裸鼠移植瘤具有较好的诱导凋亡的作用。此外,本实验还发现,与细胞凋亡密切相关的重要的功能蛋白“死亡蛋白酶”Caspase-3及Bcl-2家庭成员Bax及Bcl-2,TGF-β在肿瘤组织的含量随肠复康用药量的变化而发生相应变化。表明肠复康通过促进移植瘤Caspase-3的表达、增大Bax/Bcl-2的含量比值及对TGF-β表达的抑制可能是肠复康诱导人大肠癌HT-29裸鼠移植瘤细胞凋亡的作用机理之一。 结论:肠复康对人大肠癌细胞具有确切的诱导凋亡作用,可能与改变肿瘤组织bcl-2,caspase-3,TGF-β,Bax的表达情况有关。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 引言
• 实验研究
• 1 实验材料
• 1.1 药物制备
• 1.2 实验动物
• 1.3 实验瘤株
• 1.4 主要仪器与设备
• 1.4.1 细胞培养材料
• 1.4.2 免疫组化试剂
• 1.4.3 主要仪器
• 2 实验方法
• 2.1 动物分组
• 2.2 模型制作
• 2.3 治疗处理
• 2.3.1 空白对照组
• 2.3.2 5-Fu+CF组
• 2.3 肠复康低。中、高剂量组
• 2.4 检测指标及方法
• 2.4.1 瘤重、抑瘤率
• 2.4.2 免疫组化染色
• 2.4.3 肿瘤凋亡细胞数检测
• 2.4.4 免疫组化指标检测
• 2.5 图象观测指标及意义
• 2.5.1 灰度（即黑度）
• 2.5.2 积分光密度
• 2.5.3 平均光密度
• 3 数据统计方法
• 4 实验结果
• 4.1 一般情况观察
• 4.2 各组用药对人大肠癌的抑瘤作用
• 4.3 各组用药对大肠癌凋亡细胞数的影响
• 4.4 各组用药对人大肠癌bcl-2表达的影响
• 4.5 各组用药对人大肠癌Bax表达的影响
• 4.6 各组用药对人大肠癌caspase-3表达的影响
• 4.7 各组用药对人大肠癌TGF-β表达的影响
• 讨论
• 1 中医对大肠癌的认识
• 2 肠复康立法及组方原则
• 3 动物模型的评价
• 4 阳性对照药的选择
• 5 肠复康对人大肠癌细胞凋亡影响机理的探讨
• 5.1 肠复康具有确切的促细胞凋亡作用
• 5.2 肠复康对Bcl-2的影响
• 5.3 肠复康对bax的影响
• 5.4 肠复康对Caspase-3的影响
• 5.5 肠复康对TGF-β的影响
• 问题与展望
• 1 存在的问题
• 2 展望
• 致谢
• 参考文献
• 附件1 文献综述 大肠癌的中西医治疗进展
• 附件2 在校期间公开发表的学术论文、专著及科研成果
• 附件3 声明