论文题目: 大麦种质资源遗传多样性及贮藏蛋白基因克隆研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 作物遗传育种
作者: 侯永翠
导师: 郑有良
关键词: 大麦,种质资源,遗传多样性,分子标记,基因克隆
文献来源: 四川农业大学
发表年度: 2005
论文摘要: 本文通过对我国大麦地方品种、近缘野生材料的农艺性状考察和蛋白质含量测定，从中筛选出综合性状好或者具有一个或多个优良性状优异种质46份。采用APAGE、RAPD、RAMP和ISSR标记研究了它们之间的遗传关系。对糙稃大麦低分子量谷蛋白基因和近缘野生大麦B-hordein基因进行了分离、克隆和测序。主要结果如下： 1、对212份大麦种质资源(包括105份近缘野生材料和107份地方品种)进行了农艺性状考察和籽粒蛋白质含量测定，结果表明每个性状的变异都较大。生育期138-～199d，株高61.2～140.5cm，有效穗数3～16个，穗长3.9～17.8cm，小穗数16～30个，穗粒数20～97粒，千粒重21.8～59.1g，穗粒重0.5～2.9g，蛋白质含量9.80～22.14％。从中筛选出了46份综合性状好或者具有一个或多个优良性状的优异种质，为进一步在育种和生产中加以利用提供了理论依据和物质基础。 2、对212份供试材料各考察性状间的相关分析结果表明：有效穗数与穗长，小穗数与穗粒重呈显著正偏相关，生育期与千粒重呈极显著负偏相关，穗长与穗粒数呈显著负偏相关，其余性状间偏相关均不显著。表明9个性状虽然具有较复杂的相关关系，但是产量性状(有效穗数、小穗数、穗粒数、穗粒重、千粒重)以及品质性状(蛋白质含量)相互之间不存在显著或极显著的负效应，在选择时能够较好地协调它们之间的关系。 3、利用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Acid-polyacrylamide gel electrophoresis，APAGE)法检测结果表明，46份供试材料具有丰富的醇溶蛋白等位变异，每份材料均具有唯一独特的醇溶蛋白带型，共分离出36条相对迁移率不同的谱带，每份材料可电泳出15～26条，平均19条，有3条带为所有材料共有，即醇溶蛋白带纹的多态性为91.67％。材料间的遗传相似系数(GS)变异范围为0.468～0.976，平均值为0.737。聚类分析发现，同一类群或者相同地理来源的材料能够部分地聚成一类或亚类，表明醇溶蛋白图谱类型与材料的类群和生态地理环境有一定相关性。 4、利用RAPD标记检测结果表明，46份供试材料间遗传差异明显。32个引物共扩增出116条DNA片段，其中84条具有多态性，每个引物可扩增出1～8条DNA
论文目录:
第一章 文献综述与立题依据
1 品质及产量性状研究
2 细胞遗传学研究
3 生化标记
3.1 同工酶
3.2 醇溶蛋白
4 分子标记
4.1 RAPD标记
4.2 SSR标记
4.3 ISSR标记
4.4 RAMP标记
4.5 STS标记
4.6 AFLP标记
4.7 细胞质基因组研究
4.8 基因组原位杂交(GISH)
4.9 rDNA分析
4.10 5SrRNA分析
5 贮藏蛋白基因克隆
6 大麦有益基因向小麦的导入
7 立题依据
第二章 大麦地方品种和近缘野生大麦农艺性状及蛋白质含量分析
1 前言
2 材料和方法
2.1 供试材料
2.2 农艺性状考察
2.3 蛋白质含量测定
2.4 数据处理
3 结果与分析
3.1 农艺性状及蛋白质含量表现
3.2 相关分析
4 讨论
第三章 优异大麦种质资源的醇溶蛋白多态性研究
1 前言
2 材料和方法
2.1 供试材料
2.2 醇溶蛋白检测
2.3 数据处理
3 结果与分析
3.1 醇溶蛋白多态性
3.2 醇溶蛋白遗传相似性系数分析
3.3 醇溶蛋白聚类分析
4 讨论
第四章 优异大麦种质资源的RAPD、RAMP和ISSR分析
1 前言
2 材料和方法
2.1 供试材料
2.2 基因组DNA提取
2.3 RAPD检测
2.4 RAMP检测
2.5 ISSR检测
2.6 数据处理
3 结果与分析
3.1 扩增产物多态性
3.2 遗传相似性
3.3 聚类分析
3.4 三种标记间的相关分析
4 讨论
4.1 大麦种质资源的遗传多样性
4.2 RAPD、RAMP与ISSR标记在大麦种质资源研究中的应用
4.3 RAPD、RAMP与ISSR标记的一致性及多态性位点的有效性
第五章 糙稃大麦(H.brevisubulatum ssp.turkestanicum Nevski)LMW-GS基因序列分析
1 前言
2 材料和方法
2.1 供试材料
2.2 基因组DNA提取
2.3 PCR引物设计、基因组DNA扩增及电泳分析
2.4 PCR产物回收、纯化
2.5 连接并转化
2.6 阳性克隆筛选
2.7 序列测定与比较分析
3 结果与分析
3.1 PCR扩增、目的片段克隆与测序
3.2 核苷酸和氨基酸序列分析
3.3 核苷酸序列同源性比较
3.4 系统进化分析
4 讨论
4.1 糙稃大麦中LMW-GS基因的存在
4.2 Ht1、Ht2和Ht3的类型
4.3 Ht1、Ht2和Ht3的序列结构与品质的关系
4.4 PCR方法分离大麦LMW-GS基因的可行性
第六章 西藏近缘野生大麦(H.vulgate ssp.agriocrithon)B-hordein基因序列分析
1 前言
2 材料和方法
2.1 供试材料
2.2 基因组DNA提取
2.3 PCR引物设计、基因组DNA扩增及电泳分析
2.4 PCR产物回收、纯化
2.5 连接并转化
2.6 阳性筛选克隆
2.7 序列测定与比较分析
3 结果与分析
3.1 PCR扩增、目的片段克隆与测序
3.2 Ha1、Ha2和Ha3的序列特征及序列比较分析
3.3 氨基酸序列同源性比较
4 讨论
4.1 B hordein基因与LMW-GS基因结构和功能比较
4.2 PCR方法分离大麦B-hordein基因的可行性
参考文献
致谢
攻读学位期间发表的学术论文目录
发布时间: 2006-11-01
参考文献
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