API-MS离子化规律及LC-MS联用技术在药物和内源性物质代谢中的应用研究

论文摘要

大气压离子化（API）质谱是一种软电离技术，对于各种类型的化合物（包括极性的、不稳定的、大分子化合物、药物及代谢产物），API都能进行有效的离子化。特别时近年来，API质谱与色谱的成功联用，这种技术越来越广泛被用在药物代谢和内源性物质的分析中，使微量成分的分析成为可能。对于无生色团的化合物，该方法提供了一种普遍的检测手段。目前，HPLC-MS联用技术的飞速发展，已成为一种常规的应用技术。HPLC-MS联用技术将从现在主要应用于天然药物研究、药代动力学研究、药物筛选、复杂药物分析等药学领域，逐渐扩展到生物大分子、生命学科领域。未来分析方法学的进步将依赖于色谱分离技术及质谱检测能力的发展，与此同时，定量测定、筛选和鉴定靶向药物成分以及未知代谢物等分析应用又会进一步推动HPLC-MS联用技术的发展。论文从探讨ESI和APCI对不同类型化合物离子化规律入手，并以LC-MS作为主要研究工具，在建立LC-MS分析方法的基础上，检测了临床病人血浆中格列苯脲的代谢情况；对替米沙坦片剂进行了生物等效性研究；对阿奇霉素胶囊进行了相对生物利用度和绝对生物利用度研究；测定了人血浆中25-羟基维生素D3。论文内容主要包括以下几方面： 1 应用ESI-MS和APCI-MS对各类药物及部分内源性化合物在不同的条件下进行全扫描，从质谱图中发现不同基团的化合物离子化时形成的加合物不同，不同结构的化合物离子化的方式也不尽相同，同一种化合物在不同离子化条件下会得到不同的分子离子。通过本试验初步总结出了化合物离子化的规律。 2 通过优化色谱和质谱条件，确定以ESI正离子方式测定人血浆中格列苯脲的含量，对方法的重复性和准确性也进行了验证，证明该方法灵敏度高和选择性、重复性好、可靠。应用此方法对9位临床糖尿病患者口服格列苯脲后血药浓度进行了监测，得出了药物浓度—时间曲线和动力学参数，为临床用药和治疗提供科学依据。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 前言
• 1.1 大气压电离源（Atmosphere pressure Ionization,API）
• 1.1.1 电喷雾离子化（Electmnspray Ionization,ESI）
• 1.1.2 大气压化学电离（AtmosphericpressurechemicalIonization,APCI）
• 1.2 色谱-质谱（LC-MS）联用技术
• 1.3 液相色谱—大气压离子化质谱（LC-API-MS）联用技术在药物吸收、分布、代谢、排泄、毒性（ADME／TOX）的应用
• 第二章 药物和部分内源性物质在API质谱中离子化规律的探讨
• 2.1 实验材料和仪器
• 2.1.1 实验材料
• 2.1.2 仪器
• 2.2 结果
• 2.2.1 大环内酯类药物的全扫描图谱：
• 2.2.2 心血管系统药物的质谱扫描图：
• 2.2.3 氨基糖苷类抗菌素
• 2.2.4 降糖药
• 2.2.5 抗精神病药
• 2.2.6 抗病毒药
• 2.2.7 抗肿瘤药
• 2.2.8 甾体类化合物
• 2.2.9 其他药物
• 2.3 讨论
• 2.3.1 大环内酯药物的离子化特点
• 2.3.2 可以形成双分子离子的化合物
• 2.3.3 甾类化合物的离子化特点
• 2.3.4 其他结构的化合物的离子化
• 2.4 结论
• 第三章 液相色谱电喷雾质谱测定格列苯脲方法的建立及临床病人血药浓度监测
• 3.1 实验部分
• 3.1.1 试剂和药品
• 3.1.2 仪器
• 3.1.3 色谱条件
• 3.1.4 质谱条件：
• 3.1.5 标准贮备液、校正标准和质控样品的制备
• 3.1.6 样品处理
• 3.1.7 线性范围、精确度、准确度回收率
• 3.2 结果和讨论
• 3.2.1 色谱和质谱条件的选择
• 3.2.2 方法验证
• 3.2.3 临床病人服药后不同时间血药浓度测定结果
• 3.3 结论
• 第四章 替米沙坦血浆浓度测定方法及生物等效性研究
• 4.1 实验部分
• 4.1.1 实验材料
• 4.1.2 仪器与试剂
• 4.1.3 质谱条件
• 4.1.4 色谱条件
• 4.1.5 标准储备液、标准系列和质控样品制备
• 4.1.6 基质效应和方法选择性评价
• 4.1.7 研究对象
• 4.1.8 试验设计
• 4.1.9 试验过程
• 4.1.10 生物标本采集与样品处理
• 4.1.11 数据处理
• 4.2 结果与讨论
• 4.2.1 色谱、质谱条件的选择
• 4.2.2 方法验证
• 4.2.2.1 基质效应
• 4.2.2.2 选择性
• 4.2.2.3 灵敏度和线性
• 4.2.2.4 重复性和准确度
• 4.2.2.5 稳定性
• 4.2.3 生物等效性研究结果
• 4.3 结论
• 第五章 LC-ESI-MS测定血浆中阿奇霉素及阿奇霉素肠溶片的人体相对生物利用度和绝对生物利用度研究
• 5.1 材料和方法
• 5.1.1 仪器
• 5.1.2 试剂
• 5.1.3 标准贮备液、标准系列和质控样品的配制
• 5.1.4 色谱质谱条件
• 5.1.5 研究对象和试验设计
• 5.1.6 样品收集和处理处理
• 5.1.7 数据处理
• 5.2 结果与讨论
• 5.2.1 色谱与质谱条件的选择
• 5.2.2 方法验证
• 5.2.2.1 基质效应
• 5.2.2.2 线性范围和最小可定量浓度
• 5.2.2.4 方法回收率和精密度
• 5.2.2.5 样品稳定性试验
• 5.2.3 生物利用度和生物等效性研究结果
• 5.3 结论
• 第六章 LC-APCI-MS测定人血浆中维生素D3的代谢产物-25-羟基维生素D3的含量
• 6.1 实验部分
• 6.1.1 试剂和标准品
• 6.1.2 仪器
• 6.1.3 色谱条件
• 6.1.4 质谱条件
• 6.1.5 样品收集和处理
• 6.2 结果与讨论
• 6.2.1 质谱色谱条件的选择
• 6.2.2 样品处理方法的选择
• 6.2.3 标准曲线、精密度和重复性
• 6.2.4 不同年龄人血浆样品25-OH-VD3测定结果
• 6.3 结论
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间主要的研究成果