论文摘要
小麦是全球种植面积最广的粮食作物之一。一直以来,人们主要注重对其种子的利用,而忽略了小麦苗这一天然资源的综合利用。研究表明,小麦苗中含有丰富的超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase, SOD）, SOD具有清除超氧自由基（·02-）功能,能够有效地预防·02-对机体的毒害作用。本研究以小麦苗为原料,对SOD的分离及纯化技术进行了研究,并利用提取、纯化后所得SOD进行体外和体内抗氧化活性研究。主要研究结果如下：1.采用磷酸盐缓冲液法处理小麦苗提取抗氧化组分SOD,并用邻苯三酚自氧化法对SOD的活性进行测定,以SOD活性（U.mL-1）为指标,考察料液比、磷酸缓冲液pH值、抽提时间、热处理温度、热处理时间5个工艺参数,最后用响应面法优化提取工艺。得到SOD的最佳提取工艺为：磷酸缓冲溶液pH为8,抽提时间为1h,热处理温度为70℃,热处理时间为15min。测得此条件下SOD的活性为587.6（U/mL）。2.经硫酸盐分级沉淀、透析、DEAE-52纤维素柱层析及SephadexG-75分子筛柱层析纯化SOD,采用考马斯亮蓝G-250法测蛋白含量,得干粉1.53 mg,酶的比活力为457.8 U/mg-Pr,活性回收率为55.1%,纯化倍数为28.3。经非变性凝胶电泳（PAGE）及SDS-PAGE均得到一条谱带,纯度达到了电泳纯。对其理化性质分析表明：该酶的最大紫外吸收峰为262nm,其分子量为32.1 KD,对KCN、H2O2十分敏感,对氯仿-乙醇不敏感,小麦苗中SOD的类型是Cu/Zn-SOD。3.通过清除羟自由基、清除DPPH自由基的能力以及还原能力三种抗氧化体系的测定进行体外抗氧化活性的评价。分析结果表明：对·OH的清除作用,小麦苗SOD酶液>1mg/mL Vc>麦苗汁>小麦苗SOD粗酶液>1mg/mL芦丁；对DPPH-的清除作用,小麦苗SOD酶液与1mg/mL Vc、1mg/mL芦丁清除DPPH-的能力基本持平,且均大于麦苗汁与SOD粗酶液对DPPH-的清除能力：还原能力的测定,1mg/mL Vc>麦苗汁>小麦苗SOD酶液>小麦苗SOD粗酶液>1mg/mL芦丁。4.体内抗氧化活性研究通过测定小鼠肝组织中MDA含量、GSH-Px活性与CAT活性进行评价。分析结果表明：MDA含量：高剂量组与正常对照组比较差异显著,但与阳性对照组比较差异不明显；GSH-Px活性：高剂量组与正常对照组、阳性对照组比较皆差异显著；CAT活性：高剂量组与正常对照组、阳性对照组比较皆差异显著。这说明服用一定剂量（高剂量组,0.8mg·mL-1）的小麦苗SOD能降低MDA含量、提高GSH-Px、CAT活性,从而提高抗氧化能力,但与番茄红素相比,还有一定的差距。