论文摘要
目的:探讨灯盏细辛及其活性成分灯盏乙素的抗肿瘤作用及其作用机制。方法:采用体外细胞培养和类血管网状结构形成实验测定了中草药灯盏细辛各种提取物的抗肿瘤作用;用Alamar Blue的方法筛选灯盏细辛中的有效成分灯盏乙素对38种肿瘤细胞增殖的影响;从中筛选出这种活性成分对人Burkitt’s淋巴瘤细胞株Namalwa的增殖有较强的抑制作用;以流式细胞仪检测不同浓度灯盏乙素处理Namalwa后的细胞周期分布改变;Annexin V-FITC和PI双染标记检测灯盏乙素对Namalwa细胞凋亡的影响;应用RT-PCR技术检测调控细胞周期的关键基因的表达;以蛋白印迹法分析灯盏乙素诱导Namalwa细胞凋亡相关蛋白的表达水平情况。结果:中草药灯盏细辛的提取物能有效抑制类血管网状结构;灯盏细辛中的活性成分灯盏乙素具有普遍的抗肿瘤作用,对38种肿瘤细胞的增殖均有抑制作用,尤其可以较强地抑制淋巴瘤细胞株Namalwa的增殖,灯盏乙素对Namalwa细胞的抑制率随着药物浓度增加而增加,在一定浓度范围内,组间及组内比较有统计学差异（P<0.05）;灯盏乙素处理Namalwa细胞后,流式细胞仪检测细胞周期各时相分布发生变化,随着灯盏乙素作用浓度的增加,G0/G1期细胞显著增多,G2/M期细胞减少,与对照组相比有显著性差异（P<0.05）;Annexin V-FITC和PI双染证实了灯盏乙素能诱导Namalwa细胞凋亡;RT-PCR分析表明了灯盏乙素可下调Namalwa细胞的cyclinD1和CDK4的mRNA水平;蛋白印迹检测证实,经灯盏乙素作用,Namalwa细胞的caspase3、cytochrome c表达水平下降,但cytochrome c多聚体表达升高。结论:中草药灯盏细辛提取物具有抑制类血管网状结构形成的作用,其有效成分灯盏乙素有很好的抗肿瘤作用,尤其对淋巴瘤细胞株Namalwa,在低剂量能显著抑制Namalwa细胞增殖,主要通过调节cyclinD1和CDK4的表达来实现,而在高浓度则诱导Namalwa细胞凋亡,并主要通过调节caspase3和cytochrome c的表达来实现。