首页> 正文

比较不同途径移植骨髓间充质干细胞治疗脑缺血再灌注模型大鼠的效果

2020-12-16阅读(878)

比较不同途径移植骨髓间充质干细胞治疗脑缺血再灌注模型大鼠的效果

论文摘要

目的：分别采用颈动脉、尾静脉和立体定向三途径移植骨髓间充质干细胞（BMSCs）治疗大脑中动脉栓塞（MCAO）模型大鼠,比较三途径移植BMSCs对MCAO模型大鼠的疗效及其详细的作用机制。方法：直接贴壁法分离培养、纯化和扩增BMSCs;流式细胞仪鉴定BMSCs表面抗原CD90、CD29、CD106、CD34、CD45、CD11b; 10μmol/L的Brdu标记示踪BMSCs;线栓法制作MCAO模型大鼠；经颈动脉、尾静脉和立体定向途径分别移植3×106 BMSCs治疗MCAO建模后第7天的SD大鼠；建模后第1、7、14、21、28、35天分别采用改良神经功能损伤评分（mNSS）、粘附实验和体重评估大鼠的神经功能和体能恢复情况；建模后第35天处死大鼠,取脑组织做组织学,免疫荧光及免疫组化染色：Bielshowsky’s-Luxol Fast Blue双染检测神经纤维的再生情况；直接免疫荧光法检测Brdu标记的BMSCs;免疫组织化学检测大鼠脑组织NSE、Nogo-A、SYN、Ki-67、GFAP及VEGF表达。结果:BMSCs贴壁生长,形态呈梭形,加入10μmol/L的Brdu孵育48h后BMSCs标记率达95.0±8.40%。BMSCs高表达CD90 （91.70%）、CD29 （88.40%）、CD106 （52.20%）,低表达CD34 （2.70%）、CD45 （5.65%）、CD11b （7.82%）。与PBS对照组比较,颈动脉途径组的大鼠神经功能于建模第14天后显著好转（P<0.05）,尾静脉和立体定向途径组于建模第21天后显著好转（P<0.05）,且建模后第35天颈动脉途径组的大鼠神经功能显著优于其它两途径组（P<0.05）。三途径BMSCs移植组与PBS对照组比较,梗死侧胼胝体的面积均显著增大（P<0.05）,且颈动脉途径组的胼胝体面积大于其它两途径组（P<0.05）。脑组织SYN、Ki-67、GFAP和VEGF的表达增多（P<0.05）, Nogo-A表达降低（P<0.05）, NSE无显著变化（P>0.05）。动脉途径组的SYN、Ki-67阳性细胞数显著高于尾静脉和立体定向途径组（P<0.05）,同时Nogo-A的表达显著低于尾静脉和立体定向途径组（P<0.05）。三途BMSCs移植组的脑梗死体积和胶质瘢痕与PBS对照组比较无统计学差异（P>0.05）。脑组织的下述抗原阳性细胞数的相关性分析：GFAP与VEGF、GFAP与Ki-67呈高度正相关（r=0.725, r=0.742, p<0.05）, Nogo-A与SYN呈高度负相关（r=-0.842,p<0.05）。结论：不同途径移植BMSCs均能促进脑梗死大鼠的神经功能恢复,但动脉途径起效更快且后期疗效优于静脉和立体定向途径。BMSCs治疗脑梗死的作用机制可能包括促进内源性细胞增殖、血管再生和突触重建,增强神经纤维修复和星形胶质细胞保护功能。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 缩略语
  • 第1章 引言
  • 第2章 材料与方法
  • 2.1 主要试剂
  • 2.2 实验动物
  • 2.3 实验设备
  • 2.4 实验分组
  • 2.5 实验方法
  • 2.5.1 全骨髓贴壁法分离和扩增BMSCs
  • 2.5.2 BMSCs的流式鉴定
  • 2.5.3 Brdu标记BMSCs与直接免疫荧光法检测标记率
  • 2.5.4 大脑中动脉栓塞（MCAO）模型大鼠
  • 2.5.5 颈动脉途径移植BMSCs治疗MCAO模型大鼠
  • 2.5.6 立体定向途径移植BMSCs治疗MCAO模型大鼠
  • 2.5.7 尾静脉途径移植BMSCs治疗MCAO模型大鼠
  • 2.5.8 检测MCAO模型大鼠的神经功能
  • 2.5.9 4%多聚甲醛灌注取脑
  • 2.5.10 脑组织HE染色
  • 2.5.11 脑组织Bielshowsky's-Luxol Fast Blue staining双染
  • 2.5.12 脑组织直接免疫组织荧光染色
  • 2.5.13 脑组织免疫组织化学染色（二步法）
  • 2.5.14 图片采集与测量
  • 2.5.15 统计学分析
  • 第3章 结果
  • 3.1 BMSCs体外培养的形态与Brdu标记
  • 3.2 BMSCs流式鉴定
  • 3.3 MCAO模型大鼠的神经功能和体重比较
  • 3.3.1 mNSS评分
  • 3.3.2 粘附实验
  • 3.3.3 体重比较
  • 3.4 HE染色测量脑梗死体积
  • +-BMSCs'>3.5 IBZ区Brdu+-BMSCs
  • 3.6 Bielshowsky's-Luxol Fast Blue双染
  • 3.7 免疫组织化学染色结果
  • +细胞'>3.7.1 IBZ区的SYN+细胞
  • +细胞'>3.7.2 SVZ区的Ki-67+细胞
  • +细胞'>3.7.3 IBZ区的Nogo-A+细胞
  • +和VEGF+细胞'>3.7.4 IBZ区的NSE+和VEGF+细胞
  • +细胞和GSR区的胶质瘢痕厚度'>3.7.5 SBZ区的GFAP+细胞和GSR区的胶质瘢痕厚度
  • 3.7.6 相关性分析
  • 第4章 讨论
  • 第5章 结论与展望
  • 5.1 结论
  • 5.2 展望
  • 致谢
  • 参考文献
  • 攻读学位期间的研究成果
  • 综述
  • 参考文献

    • 相关论文文献

    • [1].利肺片对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠的影响[J]. 中成药 2020(02)
    • [2].慢性阻塞性肺疾病大鼠模型的建立与评价[J]. 中国实验动物学报 2020(02)
    • [3].国内外大鼠和小鼠微生物、寄生虫检测标准的比较[J]. 实验动物与比较医学 2020(02)
    • [4].武夷岩茶对酒精性肝损伤大鼠的护肝作用[J]. 武夷学院学报 2020(03)
    • [5].参芎葡萄糖注射液对大鼠肺动脉高压的治疗作用及其机制[J]. 中国生物制品学杂志 2020(06)
    • [6].口服蛋氨酸饲料致大鼠心室重塑的研究[J]. 天津医科大学学报 2020(03)
    • [7].腹部推拿对结肠慢传输型便秘大鼠的治疗效果[J]. 新疆医科大学学报 2020(04)
    • [8].基于UHPLC-Q-Exactive MS分析鉴定隐丹参酮在大鼠体内的代谢产物[J]. 质谱学报 2020(04)
    • [9].针刺对慢性温和刺激大鼠粪便代谢的影响[J]. 针灸临床杂志 2020(07)
    • [10].两种不同方法制造简易大鼠挤压伤模型的研究[J]. 宁夏医科大学学报 2020(08)
    • [11].酸枣仁水提物对焦虑大鼠症状的改善及其对肠道菌群的影响[J]. 现代食品科技 2019(11)
    • [12].早期肠内营养对重症肺炎大鼠免疫功能的影响分析[J]. 中国医学前沿杂志(电子版) 2017(01)
    • [13].右美托咪定后处理对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用[J]. 临床医学工程 2017(02)
    • [14].滨蒿内酯对大鼠实验性变应性鼻炎的疗效及机制[J]. 贵州医科大学学报 2017(01)
    • [15].黄连解毒汤对营养性肥胖大鼠的毒性研究[J]. 光明中医 2017(10)
    • [16].三七总皂甙对骨折大鼠血管内皮生长因子基因扩增及蛋白表达水平影响的研究[J]. 临床医药文献电子杂志 2017(51)
    • [17].小花棘豆中毒对大鼠下丘脑—垂体—卵巢轴α-甘露糖苷酶的影响[J]. 福建农林大学学报(自然科学版) 2016(01)
    • [18].法舒地尔对百草枯致大鼠肺纤维化的干预作用[J]. 浙江实用医学 2016(01)
    • [19].富血小板血浆对创伤性颅脑损伤大鼠神经功能的保护作用[J]. 吉林大学学报(医学版) 2016(05)
    • [20].白虎汤对全身炎症反应综合征大鼠炎症因子的影响[J]. 四川中医 2015(01)
    • [21].长期饮用淡化海水对大鼠血脂影响[J]. 中国公共卫生 2015(07)
    • [22].辛伐他汀预处理对大鼠神经源性肺水肿的作用及其机制[J]. 中国动脉硬化杂志 2015(10)
    • [23].猫捉大鼠[J]. 中小学音乐教育 2020(07)
    • [24].西维来司钠对大鼠脑出血保护作用机制的实验研究[J]. 现代养生 2017(10)
    • [25].药对藿香-陈皮配伍前后对功能性消化不良大鼠的初步药效学研究[J]. 健康之路 2017(07)
    • [26].VND3207药物对中子辐照大鼠脏器指数的影响[J]. 中国原子能科学研究院年报 2016(00)
    • [27].韭菜洋葱有助睡眠[J]. 益寿宝典 2017(14)
    • [28].毒瘾也“世袭”?雄性大鼠毒瘾遗传给后代[J]. 创新时代 2017(08)
    • [29].脉冲射频治疗对带状疱疹后神经痛模型大鼠脊髓背角自噬的影响[J]. 临床麻醉学杂志 2019(12)
    • [30].麝香保心丸对高尿酸血症大鼠内皮功能的影响[J]. 中西医结合心脑血管病杂志 2019(23)

    标签：;  ;  ;  ;  ;  ;  

    比较不同途径移植骨髓间充质干细胞治疗脑缺血再灌注模型大鼠的效果
    下载Doc文档

    猜你喜欢

    © 2025 毕速过 版权所有 鄂ICP备12018319号-5