鲍鱼内脏多糖的结构和活性研究

论文摘要

从鲍鱼内脏中提取活性多糖,为提高鲍鱼内脏的附加值,促进鲍鱼的综合利用和开发提供理论和技术支持。本论文采用水煮、醇沉的方法,得到鲍鱼内脏粗多糖CAVP, CAVP经冻融分级、酶-Sevag法联合脱蛋白、SepharoseCL-6B柱层析等方法进行纯化,得到水溶性多糖AVP,苯酚-硫酸法测总糖含量为91.24%。经SepharoseCL-6B柱层析和HPLC分析,AVP为均一性多糖,分子量约为3.5万。气相色谱法分析表明AVP主要由Man、Gal、Glc三种单糖组成,其摩尔比为2.7:0.7:6.5。采用部分酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化及IR、GC、GC-MS等方法对AVP的结构进行分析。AVP经部分酸水解反应,AVP的主链由Glc单糖组成,糖链末端或支链主要由Glc和Gal组成,支链或主链边缘主要是Man。A VP甲基化分析结果表明,AVP主链部分主要由（1→4）-Glc组成,分支点为Glc的6-O处,分支点残基为（1→4,6） -Glc;支链部分主要是（1→3,6）-Man;非还原末端残基是（1→）-Gal和（1→）-Glc。应用MTT法初步考察了AVP对小鼠体外淋巴细胞增殖的影响。结果表明,AVP在100-400μg/ml浓度下,均能促进淋巴细胞的增殖,并且随着浓度的增加,促进作用越明显;在100-200μg/ml时,AVP可以促进ConA诱导的T淋巴细胞的增殖,同时对LPS诱导的B淋巴细胞的增殖有明显影响。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 引言
• 一、海洋多糖的提取和纯化
• 1.海洋多糖的提取
• 2.海洋多糖的分离
• 二、海洋多糖的结构研究
• 1.海洋多糖的结构
• 2.海洋多糖的结构分析方法
• 三、海洋多糖的活性
• 1.抗肿瘤活性
• 2.抗病毒作用
• 3.抗心血管疾病
• 4.抗氧化作用
• 5.抗疲劳作用
• 6.在化妆品中的保湿作用
• 7.海洋多糖在其他方面的作用
• 四、研究目的和意义
• 鲍鱼内脏多糖提取与纯化
• 一、实验材料
• 二、主要试剂与仪器
• 1.主要试剂
• 2.主要仪器
• 三、鲍鱼内脏多糖的提取
• 1.鲍鱼内脏的预处理
• 2.粗多糖的分离提取
• 3.总糖含量、蛋白含量的测定
• 四、鲍鱼内脏多糖的分离
• 1.多糖的冻融分级
• 2.脱蛋白
• 3.超滤分级
• 4.活性炭脱色素
• 5.分子筛制备柱（2.5×90cm 分部收集）
• 6.鲍鱼内脏多糖的理化性质
• 五、结果与讨论
• 1.鲍鱼内脏多糖的提取
• 2.粗多糖的性质
• 3.多糖的分离
• 4.理化性质研究
• 5.单糖组成分析
• 六、小结
• 鲍鱼内脏多糖的结构研究
• 一、实验试剂和主要仪器
• 二、实验方法
• 1.单糖组成分析
• 2.红外光谱分析
• 3.部分酸水解
• 4.高碘酸氧化和Smith 降解
• 5.甲基化分析
• 三、结果与讨论
• 1.红外光谱分析
• 2.部分酸水解
• 3.高碘酸氧化和Smith 降解
• 4.甲基化分析
• 四、小结
• 鲍鱼内脏多糖的活性研究
• 一、材料和试剂
• 二、主要仪器
• 三、CAVP 和 AVP 的体外淋巴细胞转化实验
• 1.淋巴细胞的增殖试验
• 2.Con A 诱导的T 淋巴细胞增殖试验
• 3.LPS 诱导的 B 淋巴细胞增殖试验
• 四、结果与讨论
• 1.CAVP 和 AVP 对淋巴细胞的增殖反应的影响
• 2.CAVP 和 AVP 对 ConA 诱导的T 淋巴细胞的增殖反应的影响
• 3.CAVP 和 AVP 对 LPS 诱导的B 淋巴细胞的增殖反应的影响
• 五、小结
• 论文总结
• 参考文献
• 英文缩写
• 致谢
• 附录