大鼠脑出血致多器官功能障碍综合征延髓内脏带FOS蛋白的表达及迷走神经的作用

论文摘要

目的建立大鼠脑出血（CH）致多器官功能障碍综合征（MODS）并迷走神经切断的动物模型，以及大鼠脑出血并迷走神经刺激的动物模型，观察模型大鼠肺、小肠、肝和肾的组织病理改变，检测FOS蛋白在大鼠延髓内脏带（MVZ）迷走神经背核、孤束核和下丘脑中的表达。探讨MVZ迷走神经背核、孤束核和下丘脑以及迷走神经在CH致MODS中的可能存在的调控机制。方法1．采用大鼠立体定位仪注射Ⅶ建立CH致MODS模型，采用膈下迷走神经切断法阻断迷走神经，颈部埋置电极用以刺激迷走神经：随机将80只Wistar大鼠分为假手术组（n=10）对照组（n=10只），迷走神经切断组（SDV组，n=10只），脑出血组（n=20），脑出血+迷走神经切断组（CH+SDV组，n=20）和脑出血+迷走神经刺激组（CH+SIV组，n=20只），后者又被随机分为24h和48h时相点的2个亚组，每亚组各10只。2．术后各时相点观察大鼠症状、体征，检测外周血WBC、肝肾功能、心肌酶学改变。光镜下观察肺、小肠、肝和肾组织病理变化，依据盛志勇院士提出的动物全身炎症反应综合征（SIRS）和MODS的诊断标准判断SIRS和MODS的发生率。3．采用免疫组织化学ABC法检测MVZ和下丘脑内FOS蛋白表达，同时检测Ach和NO在大鼠小肠和延髓内脏带中的表达，采用CMIA真彩色医学图象分析系统，观察各时相点MVZ和下丘脑内FOS蛋白表达的变化。4．实验数据用均数±标准差（（?）±S）表示，应用SPSS10.0统计软件包进行统计学处理，数据间差异显著性检验采用t检验、方差分析，以P＜0.05为差异有显著意义。结果1．（1）假手术组、SDV组与正常对照组相比，其呼吸、心率、体温及外周血WBC、ALT、AST、BUN、Cr、CK的差异无显著意义（P＞0.05）；（2）CH组和CH+SDV组的上述各项指标均高于正常对照组、假手术组、SDV组（P＜0.01）；（3）CH+SIV组的上述各项指标均高于正常对照组、假手术组、SDV组（P＜0.05），但较CH组和CH+SDV组低（P＜0.05）：（4）CH+SDV组与CH组比较，其呼吸、心率、CK的差异无显著意义（P＞0.05），体温、外周血WBC、ALT、AST、BUN、Cr的差异有显著意义（P＜0.05或P＜0.01）。3．大鼠脑出血后各时相点各脏器组织均有不同程度的炎性损害，CH组在24h-36h时相点的脏器病理变化最显著，在48h逐渐消退；CH+SDV组出血后，12h肺、小肠、肝、肾出现明显的非特异性炎症反应，在24h的脏器病理变化最显著，48仍见较明显炎症反应；CH+SIV组24h出现较明显的非特异性炎症反应，36h开始逐渐消退，48h炎症反应不明现。4．正常对照组和假手术组MVZ内FOS阳性表达极少，SDV组MVZ内FOS蛋白表达略多，但与正常对照和假手术组的差异无显著性（P＞0.05）。CH组MVZ内FOS阳性表达明显高于正常对照组、假手术组、SDV组（P＜0.01），在延髓背内侧部的孤束核、最后区、迷走神经背运动核和腹外侧网状核较密集；CH+SDV组MVZ内FOS阳性表达高于正常对照组、假手术组，SDV组，但明显少于CH组（P＜0.01），分布范围局限，主要位于延髓背内侧部的孤束核和腹外侧网状核；CH+SIV组MVZ内FOS阳性表达高于正常对照组、假手术组和SDV组（P＜0.01），高于单纯CH组和CH+SDV组（P＜0.05），主要位于延髓背内侧部的孤束核和腹外侧网状核。CH组和CH+SDV组FOS蛋白表达均在24小时达到高峰，36-48小时逐渐减少。下丘脑FOS阳性表达与MVZ内FOS阳性表达一致。5．CH组，CH+SDV组和CH+SIV组SIRS的发生率均为100％；CH组MODS发生率为70％，死亡率为40％；CH+SDV组MODS的发生率为75.0％，死亡率为50％：CH+SIV组MODS的发生率为65.0％，死亡率为50.2％。结论1．采用大鼠立体定位仪注射Ⅶ的方法可成功建立脑出血致MODS的实验动物模型。2．脑出血后存在重要脏器的炎性改变及SIRS，提示SIRS是脑出血致MODS的病理学基础。3．CH后大鼠MVZ内FOS阳性表达增多提示MVZ参与了对CH后周围脏器功能的调控，是CH致MODS的直接调控中枢之一。4．膈下迷走神经切断增加了CH后MODS的发生率，增强了CH所致的周围脏器的炎性损害；而迷走神经刺激能减轻外周器官的炎性损害，提示迷走神经在CH致MODS时对周围脏器具有潜在的保护作用。5．膈下迷走神经切断+脑出血组MVZ内FOS阳性表达明显低于单纯脑出血组，而脑出血+迷走神经刺激组MVZ内FOS阳性表达明显高于单纯脑出血组，在结合外周脏器的炎性改变，提示迷走神经是脑出血致MODS时的一条双向的信息传递通路。

论文目录

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