流式细胞术分析尿脱落细胞DNA对膀胱肿瘤诊断和预后估计的回顾性研究

论文摘要

目的：更好地了解流式细胞（flow cytometry，FCM）DNA分析对膀胱肿瘤诊断的敏感性，以及异倍体峰、S期细胞峰百分比（S-phase faction，SPF）、G0／G1期变异系数（coefficient of dispersion，CV）、凋亡峰（apoptotic peak，APO）与肿瘤诊断、病理分级和预后判断之间的关系和意义。材料和方法：所有病例分为53例膀胱肿瘤组和26例非肿瘤组两组。留取两组患者的清晨第二次小便。先将标本离心10分钟，再将沉淀的细胞用PBS缓冲液清洗和离心两次，将沉淀细胞制备成细胞浓度为106／ml的悬液。按DNA-Prep Kit试剂盒操作说明将细胞的DNA用PI荧光染色。调节流式细胞仪光路系统，使CV≤2％，以人淋巴细胞为参考标准，使CV＜5％，通过FSC和SSC“设门”去除细胞碎片，通过FL2-A和FL2-W“设门”去除细胞团块。将染色细胞上机检测，再通过Multicycle软件分析数据，结果用DNA直方图表示。膀胱肿瘤诊断标准采用Collste和Klein提出的标准。将79例进行尿流式细胞DNA分析的病例分为肿瘤组和对照组，肿瘤组53例，对照组26例。其中将肿瘤组病例又分为：乳头状瘤（6例）、G1级膀胱癌（21例）、G2级膀胱癌（18例）、G3级膀胱癌（8例）四组。将FCM检测的各参数，如：FCM阳性率、异倍体比率、SPF、CV和APO等在肿瘤组和对照组，以及各级肿瘤分组间进行统计分析。所有数据均用SPSS10.0软件进行统计处理。结果：肿瘤组FCM阳性38例，对照组FCM阳性7例，肿瘤组和对照组的FCM阳性率分别是71.7％和26.9％，对两组FCM阳性率进行X2检验，P＜0.005，肿瘤组FCM阳性率显著高于对照组。肿瘤组出现异倍体细胞峰的16例，包括：G3级6例，G2级8例，G1级2例，乳头状瘤0例。对各级膀胱肿瘤出现异倍体病例数进行Fisher检验，提示从乳头状瘤到G3呈现异倍体出现逐渐增多的趋势。对照组无异倍体出现。将肿瘤组分为异倍体组和无异倍体组。异倍体组共16例，复发14例；无异倍体组共37例，复发17例。对两组复发率进行X2检验，P＜0.005，异倍体组复发率显著高于无异倍体组。肿瘤组SPF＞15％共31例，包括：G3级7例，G2级10例，G1级12例，乳头状瘤2例。对各级膀胱肿瘤SPF＞15％的比率进行两组间的Fisher检验，各组间均P＞0.05，说明各级膀胱肿瘤出现SPF＞15％的比率统计学上无明显差别。对照组中有5例SPF大于15％。对肿瘤组和对照组SPF＞15％的比率进行X2检验，P＜0.005，说明肿瘤组SPF＞15％比率显著高于对照组。各级膀胱肿瘤的SPF值：G3级SPF=32.24±8.48，G2级SPF=21.49±6.93，G1级SPF=16.70±4.55，乳头状瘤SPF=8.7±5.75。对各级膀胱肿瘤的SPF值进行方差检验，除了G2、G1组外，其余各组间的P均＜0.05，有显著性差异，说明随着肿瘤恶性程度的增加，SPF值也逐渐增加。肿瘤组中31例复发病例SPF=24.66±7.45，22例未复发病例SPF=12.87±5.67。对两组SPF值进行t检验，P＜0.005，说明肿瘤组复发病例SPF值显著高于未复发病例。肿瘤组G0／G1期CV大于9％的病例共26例，包括：G3级5例，G2级11例，G1级8例，乳头状瘤2例。对各级膀胱肿瘤G0／G1期CV＞9％的比率进行两组间的Fisher检验，各组均P＞0.05，说明各级膀胱肿瘤出现G0／G1期CV＞9％的比率统计学上无明显差别。对照组G0／G1期CV大于9％的有4例。将肿瘤组与对照组G0／G1期CV＞9％的比率进行X2检验，P＜0.005，肿瘤组G0／G1期CV＞9％的比率要显著高于对照组。肿瘤组53例病例中有17例出现APO，对照组26例病例中有3例出现APO，两组出现APO的比率进行X2检验，P＜0.05，肿瘤组出现APO比率要显著高于对照组。对照组7例FCM阳性患者中，5例合并有尿路感染；5例可疑阳性患者中，2例合并有尿路感染。在对照组的FCM阳性和可疑阳性病例中，有尿路感染情况的比例比较大，为58.3％。结论：FCM检测膀胱肿瘤方便、无创，敏感性较高。异倍体出现是膀胱肿瘤的特异性表现，有异倍体的肿瘤比无异倍体的肿瘤更容易复发。SPF＞15％和CV＞9％可以作为膀胱肿瘤诊断的参考指标，但要注意假阳性；SPF值高的肿瘤更容易复发。FCM有一定的假阳性和假阴性，诊断膀胱肿瘤时应该综合分析。

论文目录

• 一.中文摘要
• 二.英文摘要
• 三.论文
• （一） 前言
• （二） 材料和方法
• （三） 实验结果
• （四） 讨论
• （五） 结论
• （六） 参考文献
• 四.综述
• 五.致谢