论文摘要
随着世界人口结构的老龄化,骨质疏松症已成为全球公众关注的公共卫生热点,该病是以骨量降低和骨组织微细结构破坏为特征,导致骨脆性增加和容易发生骨折的全身性疾病。该病的致残率和致死率较高,是一严重威胁老年人健康长寿的多发病。原发性骨质疏松症患者血降钙素基础水平及储备功能均降低。降钙素是一类天然肽类激素,它是目前治疗骨质疏松最有效的药物之一。目前临床使用的降钙素主要是非人型降钙素,其来源有限、价格昂贵、且有弱的抗原性,限制了长期使用。 基因治疗是将外源基因导入目的细胞并有效表达,从而达到治疗目的。骨质疏松症的发病与多种基因相关,目前对骨质疏松症的基因治疗研究者不多,还多在动物实验阶段,至今在国内外文献中尚未见以降钙素为目的基因来进行基因治疗的研究报道。若能将基因治疗技术应用于骨质疏松症的治疗,将会有巨大的经济效益和社会效益。本实验研究采用基因工程技术,构建降钙素表达载体,然后通过脂质体转染方法将其降钙素基因导入靶细胞-NIH3T3细胞,获得降钙素基因持续高表达的阳性克隆细胞株。 材料和方法: 1.获得降钙素基因及其克隆 根据小鼠Ig Kappa分泌信号肽（Murine Ig Kappa Signal Peptide,MIKSP）和人的降钙素（human Calcitonin,hCT）基因的序列,将其分成六个片断合成单链寡核苷酸作为PCR的引物和cDNA合成的模板。扩增出小鼠Ig Kappa分泌信号肽和
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