电针对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡相关因子及神经再生的影响

论文摘要

文献综述和实验研究两部分组成了本论文。第一部分文献综述第一篇重点介绍了近年来国内外脊髓损伤的研究进展,主要从脊髓损伤的机制和治疗（西医、中医、其他疗法）等方面来进行评述；第二篇论述了脊髓损伤后细胞凋亡、髓鞘变化、线粒体与脊髓损伤的关系；第三篇总结了应用电针干预脊髓损伤（SCI）的实验概况和临床研究概况。第二部分动物实验目的：探讨电针干预脊髓损伤（SCI）的治疗保护作用及其神经再生的机理。方法：随机将大鼠分为模型组、空白组、西药组、电针组,脊髓损伤的动物模型,我们采用改良式的Allen’s打击法来制作,分别于脊髓损伤后6h、1d、7d进行取材。（1）大鼠脊髓损伤后的运动、感觉等神经功能,我们采用运动联合计分法（CBS）来综合评定；（2）取模型组、空白组、西药组、电针组的损伤的局部脊髓组织固定、包埋、切片、染色后进行图像分析,测定损伤后局部脊髓组织内Fas、TNFR1的表达；（3）取模型组、空白组、西药组、电针组的损伤局部脊髓组织,提取总RNA,经RT-PCR反应、电泳成像与数据分析等过程,测定损伤后局部脊髓组织内Fas、TNFR1、caspase-3、calpastatin mRNA的表达。（4）透射电子显微镜下观察损伤局部脊髓组织髓鞘、线粒体的超微结构变化。结果：脊髓损伤后6h、1d、7d,（1）与空白组比较,模型组的CBS分值有极显著性差异（P<0.01）；与模型组比较,西药组和电针组的CBS分值,经统计学分析,有极显著性差异（P<0.01）。（2）电针组和西药组均能显著降低脊髓损伤6h、1d、7d后脊髓组织中Fas、TNFR1的表达。与模型组相比较,西药组和电针组Fas、TNFR1表达均降低,经统计学分析,并都有显著性差异（P<0.05）；西药组与电针组相比较,电针组Fas、TNFR1表达略高于西药组,经统计学分析,但无显著性差异（P>0.05）。（3）电针组和西药组均能显著增加脊髓损伤6h、1d、7d后脊髓组织中Calpastatin mRNA的表达。与模型组相比较,西药组和电针组Calpastatin mRNA的表达表达均升高,经统计学分析,并都有显著性差异（P<0.05）；西药组与电针组相比较,经统计学分析,无显著性差异（P>0.05）。（4）电针组和西药组均能显著降低脊髓损伤6h、1d、7d后脊髓组织中Fas、TNFR1、caspase-3 mRNA的表达。与模型组相比较,西药组和电针组Fas、TNFR1、caspase-3 mRNA表达均降低,经统计学分析,并都有显著性差异（P<0.05）；西药组与电针组相比较,经统计学分析,无显著性差异（P>0.05）。（5）透射电子显微镜显示：与模型组比较,电针组和西药组的脊髓组织,髓鞘更致密,变性现象减少,轴索内可见线粒体,但髓鞘板层分离,部分轴突水肿、凝固变性。结论：电针（督脉）对脊髓损伤的治疗作用可能是明显降低不同时段的Fas、TNFR1的表达,从而抑制脊髓损伤的细胞凋亡、减少成纤维细胞的大量堆积-瘢痕形成,达到对神经细胞保护的重要作用。电针（督脉）对脊髓损伤的治疗作用还可能通过明显降低Caspase-3、升高Calpastatin表达,阻断凋亡信号的传导,抑制Calpain的活性,减少髓鞘脱失,保存线粒体的功能,促进脊髓组织损伤的恢复,达到电针（督脉）对脊髓损伤组织的保护作用。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要（Abstract）
• 缩略词表
• 第一部分 文献综述
• 综述一 脊髓损伤的国内外研究进展
• 1. 脊髓损伤的机制及其修复
• 1.1 脊髓损伤的机制
• 1.2 脊髓损伤的修复机制
• 2. 脊髓损伤的治疗
• 2.1 脊髓损伤的西医治疗
• 2.2 脊髓损伤的中医治疗
• 2.3 脊髓损伤的其他疗法
• 综述二 细胞凋亡、髓鞘、线粒体与脊髓损伤的关系
• 1. 细胞凋亡的概念
• 2. 细胞凋亡的途径
• 2.1 线粒体途径
• 2.2 死亡受体途径
• 2.3 内质网途径
• 3. 脊髓损伤细胞凋亡的分子机制
• 4. 髓鞘与脊髓损伤
• 综述三 电针治疗脊髓损伤的研究
• 1. 实验研究
• 1.1 电刺激的作用
• 1.2 电刺激的频率、强度
• 1.3 电场的维持时间
• 1.4 对脊髓组织形态学的影响
• 1.5 对脊髓活性物质的影响
• 1.6 对血管再生的影响
• 1.7 对神经递质的影响
• 1.8 对细胞凋亡的影响
• 1.9 对神经再生的影响
• 2. 临床治疗
• 2.1 疼痛
• 2.2 止痉
• 2.3 截瘫
• 2.4 抗抑郁
• 3. 总结
• 参考文献
• 第二部分 实验研究
• 1. 材料与方法
• 1.1 实验动物及分组
• 1.2 造模
• 1.3 治疗
• 2. 运动联合计分法评价电针对大鼠脊髓损伤后行为学的研究
• 2.1 运动联合计分法（combined behavioral scores,CBS）
• 2.2 统计方法
• 2.3 CBS计分结果
• 3. 电针对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡相关因子Fas、TNFR1的研究
• 3.1 仪器和药品
• 3.2 动物灌注固定与取材
• 3.3 数据处理方法
• 3.4 结果
• 4. 电针对大鼠脊髓损伤后Fas、TNFR1、caspase-3、calpastatin mRNA的研究
• 4.1 仪器和药品
• 4.2 动物取材
• 4.3 指标的检测
• 4.4 统计方法
• 4.5 结果
• 5. 电针对脊髓损伤后髓鞘和线粒体的超微结构变化的研究
• 第三部分 分析和讨论
• 1. 选题依据
• 2. 指标的选择依据
• 3. 干预手段的选择
• 4. 实验动物选择的依据
• 5. 脊髓损伤节段的选择
• 6. 电针对脊髓损伤大鼠模型的评价
• 6.1 脊髓损伤动物模型的制备
• 6.2 脊髓损伤动物神经功能的评定
• 6.3 脊髓损伤实验研究存在的问题与展望
• 7. 电针对脊髓损伤大鼠行为学的影响
• 7.1 治疗后（术后6h）大鼠CBS分值分析
• 7.2 治疗后（术后1d）大鼠CBS分值分析
• 7.3 治疗后（术后7d）大鼠CBS分值分析
• 8. 电针对脊髓损伤大鼠Fas、TNFR1影响
• 9. 电针对大鼠脊髓损伤后caspase-3、calpastatin的影响
• 10. 透射电子显微镜下观察电针对损伤脊髓组织髓鞘、线粒体的超微结构变化
• 11. 电针对脊髓损伤后不同时间段细胞凋亡相关因子和髓鞘、线粒体的影响
• 12. 结语
• 13. 结论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简历