论文摘要
研究目的: 抗血小板药物是抗血栓药物中非常重要的一类,血小板膜糖蛋白（GP）Ⅱb/Ⅲa(即整合素α2bβ3)阻断药是第三代抗血小板药,它可阻断血小板凝集的最终通路,不仅具有极强的抗血小板凝集作用,而且不会增加出血危险性。目前应用于临床的GPⅡb/Ⅲa阻断药主要以阿昔单抗、埃替非巴肽、替罗非班为代表,但这些药物来源困难,国内应用目前主要依赖进口,价格居高不下,很难满足我国普通民众的医疗需要,因此迫切需要我们自己研发一种可大量制备,工艺简便,成本低廉的抗血小板新药。 蛇毒中含多种具有生物活性的蛋白质,在抗血栓、止血、镇痛和抗肿瘤等多方面具有良好的应用前景。蛇毒去整合素是蛇毒前金属蛋白酶原的加工产物,它可阻断α2bβ3、αvβ3、α5β人1整合素与其配体结合,具有抑制血小板聚集、抗肿瘤、诱导血管内皮细胞凋亡等功能。蛇毒成分复杂,从蛇毒中直接分离目的蛋白不但难度高、工艺繁琐,而且蛇资源日益溃乏,蛇毒来源受限,若应用分子生物学方法体外表达蛇毒蛋白,则可大大降低生产成本,提高蛋白质产量。 基于以上目的,我们从广西产尖吻蝮蛇毒腺中提取RNA,应用基因工程方法克隆表达一种新的去整合素,并对其生物学功能进行了初步分析。 研究内容与结果: 1.尖吻蝮蛇去整合素基因克隆与序列分析 本研究从广西产尖吻蝮蛇毒腺组织提取了总RNA,经反转录获得了cDNA
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