镇江香醋发酵过程中微生物分离及其产酸特性

镇江香醋发酵过程中微生物分离及其产酸特性

论文摘要

镇江香醋是我国传统四大名醋之一,采取独特的固态分层发酵工艺,以套醪接种的方式进行接种,这一特点使得每一批醋酸发酵过程中的微生物区系相对稳定。本文采用传统的微生物分离计数方法考察镇江香醋醋酸发酵过程中产酸菌和真菌数量的动态变化情况。结果显示产酸菌数量在7d时最高,真菌数量在发酵开始时最高,此后随着发酵的进行产酸菌、真菌数量均显示不断减少地趋势。本研究同时还对分离的产酸菌和酵母菌进行测序鉴定。所测序列提交NCBI再经BLAST比对确定共分离出1种酵母菌Candida rugosa和5种产酸菌:Staphylococcus sp.、Bacillus ruris、Paenibacillus sp.、Lactobacillus casei和Acetobacter pasteurianus。此5种产酸菌中乳酸菌、醋酸菌、芽孢杆菌均属于醋醅中可以检出的常见菌群,但作为产酸的芽孢杆菌,Paenibacillus sp.和Bacillus ruris还是首次从醋醅中检出。有研究显示芽孢杆菌与醋的风味、醋的返浑和沉淀现象有关。另外对于葡萄球菌,尽管利用分子生物学方法(PCR-DGGE)已确定其在镇江香醋醋醅中的存在,但这还是首次从醋醅中获得葡萄球菌纯培养物。有文献报道某些种类的葡萄球菌在香肠、火腿等发酵食品生产过程中可产生独特的风味物质,对于其在食醋酿造过程中的具体作用还不清楚,需要作进一步探讨。对已鉴定的5种产酸菌分别进行液态发酵,然后利用HPLC分别测定发酵液中有机酸组成情况。结果显示这5种产酸菌均能生成乳酸,而在镇江香醋含有的多种有机酸成份中,醋酸含量最高,乳酸其次,因此这些产酸菌的共同作用可能是成品醋中乳酸含量较高的主要原因之一。另外从5种产酸菌液态发酵产物中共检出7种有机酸,它们分别是乳酸、乙酸、富马酸、琥珀酸、丙酮酸、酒石酸和草酸。且每种产酸菌均能生成2种以上不同的有机酸。因此推测在实际酿醋过程中,这5种产酸菌也将起着重要作用,可以产生多种有机酸,从而不仅为醋液提供一个良好的缓冲体系,降低了香醋的刺激性,同时也使醋液具有酸而不涩、酸中有甜的柔和风味,赋予镇江香醋独特的口感。另外初步研究了Bacillus ruris实验室规模下其固态发酵产酸性能,发现其结果与液态发酵时不同。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 第一章 绪论
  • 1.1 醋的生产状况
  • 1.1.1 欧美国家
  • 1.1.2 中国食醋酿造
  • 1.2 食醋的酿造工艺和生产原理
  • 1.3 镇江恒顺香醋简介及其研究进展
  • 1.3.1 传统工艺的改进以及高新技术的应用
  • 1.3.2 食醋酿造过程中微生物作用的研究
  • 1.3.3 功能性物质的研究及风味物质的分析检测
  • 1.3.4 新品醋的开发研究
  • 1.3.5 镇江香醋的保健和药用功能
  • 1.4 微生物的分子鉴定以及ARDRA 分型
  • 1.5 本课题要达到的目的与要求
  • 第二章 镇江香醋醋酸发酵过程中产酸菌、酵母菌的分离鉴定
  • 2.1 材料与方法
  • 2.1.1 仪器与试剂
  • 2.1.2 产酸菌、真菌的分离计数
  • 2.1.3 产酸菌、酵母菌的测序鉴定
  • 2.2 结果与讨论
  • 2.2.1 产酸菌的分离和鉴定
  • 2.2.2 酵母菌的分离和鉴定
  • 2.3 本章小结
  • 第三章 产酸菌产酸特性的初步研究
  • 3.1 材料与方法
  • 3.1.1 仪器与试剂
  • 3.1.2 实验方法
  • 3.2 结果与讨论
  • 3.2.1 产酸菌液态发酵时有机酸组成分析
  • 3.2.2 产酸菌固态发酵有机酸组成分析
  • 3.3 本章小结
  • 第四章 结论与展望
  • 4.1 主要结论
  • 4.2 展望
  • 致谢
  • 参考文献
  • 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文
  • 附录一 产酸菌I STAPHYLOCOCCUS SP. 16S RDNA 全长序列
  • 附录二 产酸菌II PAENIBACILLUS SP. 16S RDNA 全长序列
  • 附录三 产酸菌III LACTOBACILLUS CASEI 16S RDNA 全长序列
  • 附录四 产酸菌IV ACETOBACTER PASTEURIANUS 16S RDNA 全长序列
  • 附录五 产酸菌V BACILLUS RURIS 16S RDNA 全长序列
  • 附录六 酵母菌 CANDIDA RUGOSA 18S RDNA 部分序列
  • 附录七 5 种产酸菌(GYC)和一种酵母菌(PDA)菌落形态
  • 相关论文文献

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