9-顺式维甲酸对系统性硬皮病皮肤成纤维细胞Ⅰ型胶原及HGF/c-Met mRNA表达的影响

论文摘要

目的:（1）观察9-顺式维甲酸（9-cis-RA）对系统性硬皮病（SSc）皮肤成纤维细胞（FB）增殖的影响。（2）研究9-顺式维甲酸（9-cis-RA）对系统性硬皮病（SSc）皮肤成纤维细胞I型胶原、肝细胞生长因子（HGF）及其受体c-Met mRNA表达的影响。（3）探讨9-cis-RA的抗纤维化作用机制。方法:（1）采集SSc患者皮肤活检标本5例进行成纤维细胞原代培养。（2）MTT法检测不同浓度9-cis-RA对SSc皮肤成纤维细胞增殖活性的影响。（3）不同浓度9-cis-RA对消化传代后的成纤维细胞进行干预或特异性抗c-Met抗体和9-cis-RA联合干预,RT-PCR方法检测成纤维细胞的I型胶原、HGF和c-Met mRNA表达水平。结果:（1）MTT示10-7～10-5mol/L 9-cis-RA对SSc FB的增殖没有明显影响（P＞0.05）。（2）10-7～10-5mol/L 9-cis-RA均可抑制SSc成纤维细胞I型胶原mRNA表达（P＜0.05）。其表达量呈浓度依赖性递减。（3）10-7～10-5mol/L 9-cis-RA均可诱导SSc成纤维细胞HGFmRNA表达（P＜0.05）。其表达量呈浓度依赖性递增。c-Met mRNA表达水平则无明显差异（P＞0.05）。（3）加入特异性抗c-Met抗体可消除9-cis-RA对SSc成纤维细胞I型胶原表达的抑制作用,与单独用9-cis-RA干预组相比差异具有显著性（P＜0.05）,而与对照组相比无显著性差异（P＞0.05）。结论:9-cis-RA体外可抑制SSc皮肤成纤维细胞I型胶原mRNA的表达,并诱导HGF mRNA的表达,对c-Met表达无明显影响,其抑制胶原生成的作用可能依赖于HGF/c-Met信号通路。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 缩略词表
• 第一章 前言
• 第二章 材料和方法
• 1. 仪器设备与试剂
• 2. 实验步骤
• 2.1 标本采集
• 2.2 细胞培养
• 2.3 MTT实验检测9-cis-RA对SScFB的增殖的影响
• 2.4 加入不同浓度的9-cis-RA干预SSc成纤维细胞
• 3. 统计学分析
• 第三章 结果
• 3.1 SSc皮肤成纤维细胞的鉴定
• 3.2 9-cis-RA 对系统性硬皮病成纤维细胞增殖的影响
• 3.3 9-cis-RA 对硬皮病皮肤成纤维细胞COL1A1 mRNA表达的影响
• 3.4 9-cis-RA 对硬皮病皮肤成纤维细胞HGF mRNA表达的影响
• 3.5 9-cis-RA 对硬皮病皮肤成纤维细胞c-Met mRNA表达的影响
• 3.6 anti-c-Met 抗体+9-cis-RA 联合干预对硬皮病皮肤成纤维细胞 COL1A1 mRNA表达的影响
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 参考文献
• 综述
• 致谢