论文摘要
背景: 组织工程（tissue engineering）是应用生物学和工程学的原理,研究开发能够修复、维持或改善损伤组织功能的生物替代物的一门科学。其方法是将体外培养的高浓度功能相关的活细胞种植于天然的或人工合成的细胞外基质（extracelluar matrix,ECM）中,然后将其移植到动物体内,从而达到形成新的有功能的组织的目的。运用此项技术形成组织工程化毛囊结构,将为临床毛发移植提供取之不尽的材料来源。 毛乳头位于毛囊球部的基底,由一群高度特化的真皮成纤维细胞——毛乳头细胞组成。毛乳头细胞通过上皮-间充质间相互作用的一系列信号分子、信号通路及信号分子间相互作用,实现了诱导、控制和调节毛囊的形态发生及维持毛囊的生长发育、周期性循环的作用。体外培养人毛乳头细胞,形成组织工程化毛乳头是重建毛囊结构的关键的一步。 本实验首次利用组织工程技术及微囊化技术,体外重建“人工毛乳头”,并将其移植于裸鼠皮下,诱导局部皮肤长出肉眼可见的毛发,组织切片可见:大量发育完整的毛囊结构。同时也初步研究了人工毛乳头在体外与表皮干细胞共培养,诱导后者向毛囊上皮细胞分化的可能性。目的: 制备人头皮毛乳头细胞微囊,并观察微囊化毛乳头细胞对裸鼠背部皮肤毛囊再生的诱导作用,及其在体外诱导表皮干细胞向毛囊上皮细胞分化的可能性。方法:1、胶原酶消化法体外分离、培养人头皮毛乳头细胞,再将细胞以海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠（alginate-polylysine-alginate,APA）微囊包裹。2、以胶原凝胶作为载体,植入裸鼠背部皮下;移植空囊做为对照,观察移植部位毛发生长情况,组织学方法观测所形成的毛囊结构。3、利用表皮干细胞对IV型胶原的粘附特性,分离培养人表皮干细胞。4、将表皮干细胞与微囊化人毛乳头细胞共培养,观察表皮干细胞的生长及分化情况,用组织学方法检测培养物的形态学结构及细胞标志物的变化。结果:1、APA微囊为双层空心囊,直径约400-500 μ m,表面光滑,囊中细胞状态好。2、微囊化人毛乳头细胞皮下移植4周后,裸鼠背部皮肤移植区有白色、浓密、分布均匀
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