白首乌营养器官的发育解剖及组织培养研究

白首乌营养器官的发育解剖及组织培养研究

论文题目: 白首乌营养器官的发育解剖及组织培养研究

论文类型: 硕士论文

论文专业: 植物学

作者: 杜文亮

导师: 王庆亚

关键词: 白首乌,营养器官,发育解剖,组织培养,愈伤组织,不定芽,细胞形态学

文献来源: 南京农业大学

发表年度: 2005

论文摘要: 传统中药白首乌的主要源植物是萝藦科植物耳叶牛皮消(Cynanchum auriculatum Royle ex Wight)的干燥块根,含有C21甾体酯甙类、磷脂类、苯乙酮甙类等化学成分,具有抗氧化、调节免疫功能、抗肿瘤、抗缺氧、降血脂等多种药理活性,具有重要的开发价值。本文研究了白首乌(即主要源植物耳叶牛皮消,下同)营养器官的发育解剖过程;进行了白首乌茎段的离体培养与快速繁殖研究;对白首乌器官发生途径进行初步探索并研究了根段不定芽发生过程的细胞形态学变化。结果如下:观察了白首乌块根的生长发育过程中的形态结构变化。采用白首乌上一年的块根进行繁殖,分别从块根和不定芽的近基部发生不定根。不定根初生木质部为二原型和三原型,其次生生长有两种方式:一类不定根次生木质部中主要是导管,而薄壁细胞较少,这类不定根担负吸收和固着作用;另一种类型的不定根,其形成层产生的次生木质部含有大量的薄壁细胞,少量的导管分散在薄壁细胞之间,在次生木质部中被隔开的导管周围细胞脱分化形成副形成层,进而产生三生木质部和三生韧皮部,这种生长为异常次生生长,从而使不定根膨大,形成块根。茎横切面为椭圆形;老茎靠表皮细胞由一圈不连续的乳汁管组成,维管束具次生木质部和次生韧皮部,排成一圈。背腹型叶,栅栏组织由一层圆柱状细胞构成,海绵组织疏松,叶柄具3束维管束。茎和叶的维管束都为双韧维管束。以带侧芽白首乌茎段为外植体,对白首乌进行离体培养和快速繁殖研究。白首乌茎段以0.1%HgCl2灭菌10min为宜。初代培养基为1/2MS+0.5mg·L-1BA+0.05mg·L-1NAA。腋芽再生芽在MS+0.2mg·L-1BA+0.05mg·L-1NAA培养基上较适宜于增殖。加入0.1mg·L-1PP333促进增殖。黄化苗腋芽转入MS+3/2倍Fe+BA0.2mg·L-1+0.05mg·L-1NAA的培养基利于转绿。将增殖和壮苗后的无菌苗转入1/2MS培养基中适宜生根,其中1/2MS+0.2mg·L-1IBA培养基生根效果好。移栽成活率达100%。进行白首乌愈伤组织培养时,以叶片的愈伤组织质地为好,光照条件下适宜的培养基为0.5mg·L-12,4-D+0.5mg·L-1BA,MS+0.5mg·L-1BA培养基利于愈伤组织的增殖和分化。白首乌无菌苗培养在MS+10%蔗糖+0.1mg·L-1IBA培养基上,150d后获得膨大根段。90d的膨大根段不能诱导不定芽;而培养150d形成的膨大根段能够诱导不定芽,MS+0.5mg·L-1BA为其适宜诱导条件。通过石蜡切片观察,根段上的不定芽起源于维管形成层,为直接发生。

论文目录:

主要缩略词表

摘要

ABSTRACT

引言

第一部分 文献综述

1 生药学研究

2 繁殖与栽培研究

3 化学成分

4 药理作用

5 毒理学实验研究

6 白首乌的保健功效及开发前景

7 展望

第二部分 试验研究

第一章 白首乌营养器官形态发生及发育解剖研究

1 材料和方法

2 结果与分析

2.1 白首乌形态发生和生长

2.2 白首乌根的发育解剖过程

2.2.1 根的初生生长

2.2.2 根的初生结构及其分化

2.2.3 根早期的次生生长

2.2.4 未膨大根的次生结构

2.2.5 白首乌块根的发育过程

2.2.6 成熟块根的结构

2.3 茎的发育解剖过程

2.3.1 茎初生结构的分化

2.3.2 茎的初生结构

2.3.3 茎的次生结构

2.4 叶的发育解剖过程

2.4.1 叶片初生结构的分化

2.4.2 成熟叶片的内部解剖结构

2.4.3 叶柄的内部解剖结构

3 讨论

图版说明

图版

第二章 白首乌的离体培养与快速繁殖研究

1 材料与方法

2 结果与分析

2.1 HgCl_2处理时间对白首乌外植体污染率及萌发率的影响

2.2 试管苗的诱导

2.3 白首乌的增殖培养

2.3.1 细胞分裂素对无菌苗增殖的影响

2.3.2 生长素对增殖的影响

2.3.3 多效唑对无菌苗增殖的影响

2.3.4 Fe盐浓度对黄化苗生长的影响

2.4 生根培养

2.4.1 不同培养基对生根的影响

2.4.2 不同生长素对白首乌生根的影响

2.5 试管苗移栽

3 讨论

第三章 白首乌器官发生途径初探及细胞形态学变化

1 材料与方法

2 结果与分析

2.1 叶片、节间、叶柄不定芽诱导

2.1.1 光照和外植体对白首乌愈伤组织诱导的影响

2.1.2 2,4-D和BA、KT组合对白首乌叶片愈伤组织诱导的影响

2.1.3 愈伤组织的继代增殖与诱导分化

2.2 白首乌离体根段不定芽的诱导及细胞形态学变化

2.2.1 膨大根的诱导

2.2.2 不定芽的诱导

2.2.3 不定芽发生过程的细胞形态学变化

3 讨论

图版说明

图版

全文结论

参考文献

致谢

发布时间: 2006-10-20

参考文献

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