论文摘要
植物雌激素是一类天然产品,具有类雌激素样作用,可清除自由基和抗氧化。人参皂甙Rg1是人参的主要活性成分,染料木素(Genistein)是大豆异黄酮的主要活性成分,二者均为已知的植物雌激素。研究显示Rg1和染料木素具有神经保护作用,但其详细作用机制目前尚不清楚。本研究应用6-羟基多巴(6-hydroxydopamine,6-OHDA)诱导多巴胺能神经母细胞瘤细胞系SK-N-SH细胞损伤,采用MTT、流式细胞仪、激光共聚焦、RT-PCR、免疫印迹及荧光素酶活性检测等多种评价方法,观察Rg1和染料木素对SK-N-SH神经细胞的保护作用及胰岛素样生长因子Ⅰ受体(Insulin-like Growth Factor-ⅠReceptor,IGF-IR)阻断剂JB-1或雌激素受体(EstrogenReceptor,ER)阻断剂ICI182,780的阻断效应。实验结果如下:1.6-OHDA可剂量依赖式的损伤SK-N-SH细胞(P<0.01),Rg1和染料木素可对抗6-OHDA的毒性作用(P<0.05)。2.6-OHDA可将细胞停留在G0G1期,抑制细胞进入S期。Rg1和染料木素可促进细胞从G0G1期进入S期,此作用可以被JB-1或ICI182,780所阻断(P<0.01)。3.6-OHDA可明显升高Bax/Bcl-2的基因表达(P<0.01),Rg1和染料木素则可明显降低Bax/Bcl-2之比值。4.6-OHDA可明显升高Bax的蛋白表达(P<0.01),降低Bcl-2的蛋白表达(P<0.05),Rg1和染料木素则可明显逆转上述改变。5.Rg1和染料木素可部分拮抗6-OHDA对SK-N-SH细胞线粒体膜电位的降低作用(P<0.01),此作用可以被JB-1或ICI182,780所阻断(P<0.01)。6.Rg1和染料木素可明显升高雌激素反应元件(Estrogen Responsive Elements,ERE)及IGF-IR启动子的荧光活性(P<0.01)。以上结果表明人参皂甙Rg1及染料木素可明显对抗6-OHDA对SK-N-SH神经细胞的损伤,其机制可能与IGF-IR途径与ER途径的激活及抗凋亡有关。本研究不仅为Rg1及染料木素的神经保护作用提供了进一步的实验依据,而且为传统中药的新用途和进一步开发为可用于临床防治帕金森病的新药提供实验依据。
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