论文摘要
目的:比较引入六种不同Kozak序列口蹄疫DNA疫苗的表达水平及免疫效果。方法:在口蹄疫DNA疫苗抗原编码基因VP1起始位点引入6种不同的Kozak序列(KZ1~KZ6),插入真核表达载体pVAX1,制备口蹄疫DNA疫苗,对6-8周龄BLAB/C小鼠进行免疫,用酶联免疫吸附试验(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA),分析实验动物外周血抗VP1的抗体效价;同时插入带有绿色荧光蛋白的融合表达载体pEGFP-N1,构建6种体外表达质粒,转染HeLa细胞,进行瞬时表达并分析体外表达水平。结果:引入Kozak序列KZ6的疫苗质粒pKV6接种动物后产生的免疫抗体水平高于其它组;相应的体外表达质粒pKG6转染HeLa细胞后体外表达水平办高于其它组。结论:引入Kozak序列KZ6(带有三联密码AAA)的口蹄疫DNA疫苗,能最有效地增加疫苗的蛋白表达量,并达到最佳的免疫效果。
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