抑黄曲霉乳酸菌的筛选及菌种鉴定

论文摘要

在食品和饲料中选用纯天然生物抗菌剂替代化学防腐剂或降低化学防腐剂的剂量日趋成为食品科学研究中的热点。近年来,国内外的研究表明,部分乳酸菌具有抑制霉菌生长及其毒素形成的作用。本研究以取自各地泡菜、实验室自制泡菜、咸豆角、豆浆渣以及新鲜猪肠道和鸡肠道内容物为材料,分离到756株乳酸菌。采用牛津杯法筛选具有抑制黄曲霉(Aspergillus flavus)生长的菌株,并对筛选出的6株菌株进行生理生化特性分析及16S rRNA基因序列同源性分析。确定3株为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),2株为消化乳杆菌(Lactobacillus alimentarius),1株为亚利桑那乳杆菌(Lactobacillus arizonenensis)。6株乳酸菌抑真菌谱较广,对黑曲霉,青霉,根霉,镰刀菌均有一定的抑制作用,尤其是E3菌株对各指示菌均有抑菌效果,而其余5株菌对赤霉和圆孢毛盘菌的抑菌效果不明显。通过硫酸铵沉淀和丙酮沉淀实验确定6株乳酸菌产生的抑菌物质不是细菌素。发酵上清液中总酸的测定、乳酸对黄曲霉生长的影响、酸对乳酸菌抑菌活性的影响及发酵上清液浓度对抑菌活性的影响等实验表明,且6株菌株的原始pH值均在4左右,表明抑菌成分可能是一种乳酸菌的代谢产物,并且在低pH值的环境中,才能对黄曲霉及其他真菌具有抑制作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 缩略词
• 文献综述
• 1 黄曲霉及黄曲霉毒素的危害
• 2 去除黄曲霉污染的方法
• 3 乳酸菌抑制霉菌及其毒素的机制
• 4 乳酸菌抑制霉菌生长的研究进展
• 5 乳酸菌的分子生物学鉴定方法
• 6 抑菌作用的测定方法
• 1 引言
• 1.1 研究意义与理论依据
• 1.2 本研究拟解决的问题
• 2 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 产酸菌的分离纯化
• 2.2.2 孢子悬液的制备及指示菌浓度的确定
• 2.2.3 发酵上清浓缩液的制备
• 2.2.4 抑菌实验
• 2.2.5 产抑菌物质菌株的鉴定
• 2.2.6 165 rRNA 分子生物学鉴定
• 2.2.7 抑菌物质的初步分析
• 3 结果和分析
• 3.1 产酸菌的分离培养
• 3.2 指示菌浓度的确定
• 3.3 产抑菌物质菌株的筛选
• 3.4 抑菌谱
• 3.5 产抑菌物质菌株的鉴定
• 3.6 抑菌物质的初步分析
• 4 讨论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简介
• 在读期间发表的学术论文