论文摘要
20世纪末,病毒全基因组测序、生物信息学分析、蛋白质组学和DNA芯片技术的发展为病毒研究领域带来了前所未有的变革。应用生物信息学数据库和工具,可对现有的流感病毒序列进化规律进行研究。通过对病毒序列的分析,可以预测病毒的关键抗原位点或病毒突破宿主障碍的关键氨基酸残基的变化。从而为传统方法无法取得成功的疫苗研究带来了希望。同时也可对病毒进化过程中宿主障碍突破可能带来的大流行提供预测和有力争取预警时间。流感病毒疫苗生产现在存在许多需要改进的方面,比如使用鸡胚生产流感疫苗的不利于应对大规模流感爆发等问题。Vero细胞是WHO生产疫苗指定细胞,能够利用生物反应器进行大规模培养,在流感疫苗生产上有着广阔的应用前景。但Vero细胞不是流感病毒的天然易感细胞,因此建立流感病毒Vero细胞适应株的基因组并通过反向遗传学技术制备生产毒株对于流感疫苗的生产具有重要意义。本试验使用流感病毒Vero细胞适应株A/kunming/1/2005va,设计带有Esp3I或Ecol31I酶切位点的引物,用RT-PCR扩增A/kunming/1/2005va的8个基因全长片段,通过点突变将PB2基因中的两个Ecol31I位点突变后将这八个基因片段分别连接至双向表达载体PHW2000上,从而构建了流感病毒Vero细胞适应株的基因组,为遗传重配生产在Vero细胞上高产的流感病毒提供了可供选择的基因库。接着通过将A/Kunming/1/2005与A/kunming/1/2005va基因及编码蛋白序列的比对,提供了病毒进化的理论依据,对改造流感病毒以便于生产高产量和可在Vero细胞基质上生产流感疫苗提供了理论指导。
论文目录
相关论文文献
- [1].数字RT-PCR技术检测H3N2亚型猪流感病毒方法的建立[J]. 中国畜牧兽医 2017(06)
- [2].广东省活禽市场外环境重配H3N2亚型禽流感病毒污染调查[J]. 中国病原生物学杂志 2020(06)
- [3].2015年杭州地区3C系甲型H3N2流感病毒的流行及血凝素基因特征研究[J]. 中国预防医学杂志 2017(01)
- [4].奥司他韦治疗群体性成人甲型H3N2流感[J]. 中国新药与临床杂志 2015(04)
- [5].2010-2015年湖北省H3N2亚型流感病毒抗原漂移分析[J]. 疾病监测 2017(05)
- [6].2009年-2012年上海地区儿童甲型H3N2流感病毒的耐药性监测[J]. 中国卫生检验杂志 2014(11)
- [7].H3N2亚型猪流感病毒多克隆抗体的制备及间接ELISA方法的建立[J]. 山东畜牧兽医 2012(02)
- [8].H3N2亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测方法的建立[J]. 黑龙江畜牧兽医 2015(13)
- [9].年龄和流感病毒暴露对免后血清与H3N2亚型变异株交叉反应的影响[J]. 中华疾病控制杂志 2020(10)
- [10].1株H3N2亚型猪流感病毒的分离鉴定[J]. 中国兽医杂志 2012(12)
- [11].抗H3N2亚型猪流感病毒单克隆抗体的制备与鉴定[J]. 畜牧与兽医 2010(09)
- [12].2013～2014年度中国H3N2亚型流感病毒病原学特征分析[J]. 病毒学报 2015(01)
- [13].四株分离自同一猪场的H3N2亚型猪流感病毒的进化分析[J]. 畜牧兽医学报 2020(04)
- [14].东莞市猪流感(H3N2)血清学调查[J]. 黑龙江畜牧兽医 2011(03)
- [15].H3N2亚型禽流感病毒及猪流感病毒感染人肺腺癌细胞后增殖的差异性变化[J]. 动物医学进展 2017(04)
- [16].纳米银对流感病毒H3N2的抑制作用[J]. 山东医药 2010(08)
- [17].流感H3N2疫苗纳米乳佐剂的优化及安全性[J]. 中国生物制品学杂志 2014(06)
- [18].H3N2亚型猪流感病毒的分离鉴定及其特性研究[J]. 黑龙江畜牧兽医 2011(09)
- [19].1996～2004年中国福建省甲3亚型流感病毒(H3N2)的分子进化[J]. 中国科学(C辑:生命科学) 2008(06)
- [20].表达H3N2亚型猪流感病毒血凝素蛋白的重组腺病毒在猪体内的免疫试验[J]. 微生物学报 2009(05)
- [21].2010-2016年唐山市H3N2亚型流感病毒血凝素基因特征分析[J]. 中国病原生物学杂志 2017(07)
- [22].纳米银抗流感病毒H3N2作用的实验研究[J]. 山东医药 2010(16)
- [23].甘肃省猪流感(H3N2)抗体的血清学调查研究[J]. 畜牧兽医杂志 2008(01)
- [24].两株鸭源H3N2亚型禽流感病毒分离株的分离与鉴定[J]. 中国预防兽医学报 2014(06)
- [25].纳米银体外抗H3N2流感病毒作用及其机制初步探讨[J]. 华西医学 2011(01)
- [26].哈尔滨市2015年H3N2型流感病毒分子特性及耐药性研究[J]. 中国卫生检验杂志 2017(10)
- [27].海南省2019—2020年H3N2亚型流感病毒血凝素基因特性[J]. 中国热带医学 2020(09)
- [28].南宁分离株A(H3N2)流感病毒神经氨酸酶遗传变异及蛋白结构分析[J]. 中国病原生物学杂志 2015(07)
- [29].2017年江苏省H3N2流感病毒血凝素与神经氨酸酶分子特征及耐药性分析[J]. 医学研究生学报 2019(12)
- [30].H3N2亚型禽流感病毒三重RT-PCR检测方法的建立[J]. 动物医学进展 2015(02)