PRIMA-1诱导骨肉瘤细胞珠MG-63凋亡的研究

论文摘要

目的研究PRIMA-1对人骨肉瘤细胞珠MG-63的增殖和凋亡的影响，并探讨其可能发生的机制。方法分别以50μg／ml、100μg／ml、150μg／ml、200μg／ml、250μg／ml的PRIMA-1与P53突变型人骨肉瘤细胞MG-63共培养48小时。相差显微镜下观察细胞的形态变化，采用MTT法检测PRIMA-1对细胞MG-63增殖的影响，流式细胞仪检测细胞凋亡发生率，同时逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）检测Bax mRNA、PUMA mRNA、bcl-2 mRNA的变化，Western-Bloting检测P53、P53Ser15、Bax、PUMA、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达变化情况。结果分别以50μg／ml、100μg／ml、150μg／ml、200μg／ml、250μg／ml的PRIMA-1与P53突变型人骨肉瘤MG-63细胞共培养48小时后，相差显微镜下见死细胞逐渐增多，活细胞逐渐变少，细胞分布稀疏，细胞内碎片增多。MTT法检测PRIMA-1抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制率分别为（3.6±0.8）％、（15.2±1.2）％、（50.1±2.3）％、（63.3±3.5）％、（68.7±4.3）％（P＜0.05）；流式细胞术检测细胞早期调亡百分率分别为（45.2.1±2.8）％、（36.5±3.8）％、（27.1±3.1）％（11.7±0.6）％和（3.4％±0.3）％，晚期调亡百分率分别为（11.4±1.1）％（12.6±1.9）％、（13.9±1.6）％、（24.2±2.5）％、（40.4±3.6）％（P＜0.05）。逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）显示Bax mRNA、PUMA mRNA表达均增高，bcl-2 mRNA表达明显降低。Western-Bloting检测到P53、P53Ser15、Bax、PUMA、Caspase-3、Caspase-9表达明显上调，而bcl-2表达明显下调。结论PRIMA-1在体外能显著抑制P53突变型人骨肉瘤细胞MG-63的增殖并诱导其调亡，这种机制可能依赖于促进MG-63细胞P53蛋白的表达，并恢复突变P53蛋白的野生型结构和功能，从而进一步上调Bax和PUMA的表达，下调bcl-2的表达。

论文目录

• 1. 中文摘要
• 2. 英文摘要
• 3. 前言
• 4. 材料与方法
• 5. 结果
• 6. 讨论
• 7. 参考文献
• 8. 图表
• 9. 综述
• 10. 致谢