辽东栎合子胚的离体培养

论文摘要

辽东栎（Quercus liaotungensis Koidz.）是壳斗科栎属树种,具有很高的经济和生态价值。辽东栎通常用种子繁殖,但辽东栎种子易受橡实象鼻虫危害,不耐贮藏,存在明显的大小年现象,而且常规扦插繁殖极为困难,从而制约着辽东栎的造林和开发利用。组织培养有望克服这些问题。因此,有必要探讨辽东栎的离体培养和植株再生。本研究首次以辽东栎成熟合子胚和未成熟合子胚为外植体,分别初步建立了辽东栎的器官发生和体细胞胚胎发生技术体系,对影响辽东栎器官发生和体细胞胚胎发生的影响因素进行了分析。因此,本研究不仅对辽东栎离体快繁技术的建立具有重要实践意义,对栎属树种的离体培养也具有重要的参考价值。本研究得到的主要结论如下：1.以辽东栎成熟合子胚为外植体诱导丛生芽和植株再生（1）不同培养基和激素对不定芽的诱导的影响差异显著,丛生芽诱导试验中,最佳诱导培养基为MS培养基,最佳激素组合为0.5 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L 6-BA,该组合对辽东栎不定芽的诱导率最高,达到71.7%。（2）不同激素对不定芽增殖影响差异显著。最适增殖培养基及激素组合为：MS+0.5 mg（?）NAA+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L GA3,增殖系数最高达4.3。（3）生根培养中,适当降低大量元素的含量,生根效果好,最佳生根培养基为1/2MS培养基,最佳激素浓度为0.5 mg/L NAA,蔗糖浓度30g/L时,根系生长健壮,不定芽生根率最高达77.8%,平均根长约为4.3cm。2.以辽东栎未成熟合子胚为外植体诱导体胚（1）体胚诱导的最佳培养基和激素组合为：MS+1.0mg/L6-BA+0.1 mg/L2,4-D,体胚诱导率最高达86.7%。（2）体胚增殖试验中,适当降低激素浓度,增殖效果更好。最佳培养基和激素组合为：MS+0.1 mg/L 6-BA+0.01mg/L NAA,最高增殖率达93.3%。（3）体胚成熟试验中,适当增加蔗糖浓度,体胚成熟率高。蔗糖浓度5%时,成熟体胚畸变较少。最佳培养基和激素组合为：MS+0.5 mg/L6-BA+0.3 mg/L ABA,最高成熟率达71.1%。（4）体胚萌发试验中,最佳培养基和激素组合为：1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA,最高生根率达44.4%,平均根长达4.1 cm。（5）植株再生试验中,最佳培养基和激素组合为：1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,完整植株最高萌发率达8.9%。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 1.1 辽东栎概况
• 1.2 栎属植物器官发生研究概况
• 1.2.1 丛生芽诱导
• 1.2.2 增殖培养
• 1.2.3 生根培养
• 1.3 栎属植物体胚发生研究概况
• 1.3.1 体胚诱导
• 1.3.2 体胚增殖
• 1.3.3 体胚成熟
• 1.3.4 体胚萌发
• 1.4 研究的目的意义
• 第二章 辽东栎成熟合子胚培养诱导丛生芽与植株再生
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 试验材料
• 2.1.2 材料灭菌
• 2.1.3 丛生芽的诱导
• 2.1.4 丛生芽的增殖
• 2.1.5 生根培养
• 2.1.6 炼苗移栽
• 2.1.7 培养条件
• 2.1.8 统计分析
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 辽东栎成熟合子胚培养诱导丛生芽
• 2.2.2 辽东栎成熟合子胚诱导丛生芽的增殖培养
• 2.2.3 辽东栎成熟合子胚诱导丛生芽的生根培养
• 2.2.4 炼苗移栽
• 2.3 讨论
• 2.3.1 丛生芽的诱导
• 2.3.2 丛生芽的增殖培养
• 2.3.3 丛生芽的生根培养
• 2.3.4 炼苗和移栽
• 第三章 辽东栎未成熟合子胚培养诱导体细胞胚与植株再生
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 试验材料
• 3.1.2 材料灭菌
• 3.1.3 体胚的诱导
• 3.1.4 体胚的增殖
• 3.1.5 体胚的成熟
• 3.1.6 体胚的萌发
• 3.1.7 植株再生
• 3.1.8 培养条件
• 3.1.9 统计分析
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 辽东栎未成熟合子胚培养诱导体胚
• 3.2.2 辽东栎未成熟合子胚诱导体胚的增殖
• 3.2.3 辽东栎未成熟合子胚诱导体胚的成熟
• 3.2.4 辽东栎未成熟合子胚诱导体胚的萌发
• 3.2.5 植株再生
• 3.2.6 移栽炼苗
• 3.3 讨论
• 3.3.1 体胚的诱导
• 3.3.2 体胚的增殖
• 3.3.3 体胚的成熟
• 3.3.4 体胚的萌发
• 第四章 结论
• 4.1 辽东栎丛生芽诱导与植株再生
• 4.2 辽东栎体胚发生与植株再生
• 参考文献
• 附录
• 图版
• 致谢
• 攻读硕士期间发表的论文