渔用复方五倍子合剂的研制及其部份药效学研究

论文摘要

本文通过查阅大量关于中草药防治淡水鱼出血性败血症的文献资料后,通过单味中草药对嗜水气单胞菌的体外抑菌试验筛选出抑菌效果较好的中草药,根据中兽医方剂配伍的特点组方并进行配伍试验,最后拟定含五倍子、金银花、蒲公英等组分的复方A作为合剂的处方。在制备工艺的研究中,首先考察了不同提取时间对挥发油提取量的影响,然后采用传统的水提醇沉法,通过正交试验设计优化提取工艺,同时确定了纯化过程中加入乙醇的浓度以及在配液时加入增溶剂吐温-80量,得到了在室温下澄明度较好的复方五倍子合剂。在复方五倍子合剂的安全性试验中,对斑点叉尾鮰进行经口急性毒性试验,结果LD50为4.51g/kg,其95%可信范围为0.6542±0.0808,结果表明该制剂安全无毒。在本制剂的质量控制研究中,对澄明度进行了检查,同时采用高效液相色谱法对复方五倍子合剂中主要有效成分没食子酸进行了定性定量检测,没食子酸在2.0～10.0μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,合剂中没食子酸分离良好,通过6批样品进行测定,暂定没食子酸含量不低于0.3396mg/mL。通过温度、pH和光稳定性试验检测复方五倍子合剂的稳定性,在试验期内各项指标均未见明显变化,表明复方五倍子合剂具有良好的稳定性。采用经典恒温加速试验法得出该制剂的有效期为1.7年。防治试验的结果表明,本制剂对斑点叉尾鮰出血性败血症的防治效果较好,1.0%防治组的防治率为85%。肝脏和血液中生化指标测定结果表明该制剂能增强斑点叉尾鮰的非特异性免疫力。本文经过反复试验研究制作出了稳定性良好、使用安全、疗效较好的渔用复方五倍子合剂,为中草药复方制剂在水产养殖上的应用与发展提供了一些有益的尝试。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一部分 文献综述
• 1 斑点叉尾鮰出血性败血症的研究概述
• 1.1 病原
• 1.2 流行情况
• 1.3 症状及病理变化
• 1.4 诊断与防治
• 2 中草药有效成分提取及分离纯化方法概述
• 2.1 传统提取方法
• 2.2 现代提取方法
• 2.3 传统纯化方法
• 2.4 现代纯化方法
• 3 渔用中草药复方药效学研究概况
• 3.1 对病原体的作用
• 3.2 防治率的研究
• 3.3 提高机体免疫力的研究
• 4 本研究的目的和意义
• 第二部分 试验研究
• 第一章 复方五倍子合剂处方筛选的研究
• 1 材料和仪器
• 1.1 试验材料
• 1.2 方法
• 1.2.1 药液制备
• 1.2.2 菌液制备
• 1.3 体外抑菌试验
• 1.4 最小抑菌浓度的测定
• 2 结果
• 2.1 体外抑菌试验的结果
• 2.2 最小抑菌浓度的测定结果
• 2.3 讨论
• 第二章 复方五倍子合剂制备工艺的研究
• 1 材料和仪器
• 2 方法与结果
• 2.1 挥发油提取时间的考察
• 2.2 煎煮工艺的筛选
• 2.3 除杂工艺中乙醇用量的筛选
• 2.4 吐温—80浓度对挥发油增溶情况
• 2.5 制备工艺流程
• 3 讨论
• 第三章 复方五倍子合剂安全性试验研究
• 1 材料
• 1.1 试验鱼
• 1.2 试剂与药品
• 2 方法与结果
• 2.1 饲养条件
• 2.2 剂量选择及分组
• 2.3 急性毒性试验
• 2.4 半数致死量的计算
• 3 讨论
• 第四章 渔用复方五倍子合剂质量控制的研究
• 1 仪器与试药
• 2 方法与结果
• 2.1 色谱分析条件
• 2.2 溶液的制备
• 2.3 系统适用性试验
• 2.4 线性范围的考察
• 2.5 精密度试验
• 2.6 重现性试验
• 2.7 稳定性试验
• 2.8 加样回收率测定
• 2.9 样品的含量测定
• 3 讨论
• 第五章 复方五倍子合剂稳定性研究
• 1 仪器与试药
• 2 方法
• 2.1 光照对没食子酸含量的影响
• 2.2 pH对没食子酸含量的影响
• 2.3 温度对没食子酸含量的影响
• 2.4 药物有效期的预测
• 3 讨论
• 第六章 渔用复方五倍子合剂的药效学研究
• 1 材料和仪器
• 2 方法
• 2.1 药饵的制备
• 2.2 菌液制备
• 2.3 试验分组
• 2.4 肝脏指标测定
• 2.5 血液生化指标测定
• 2.6 数据处理
• 3 结果
• 4 讨论
• 第三部分 结论与创新
• 1 结论
• 2 创新
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文