论文摘要
目的:筛选和优化乙肝转阴颗粒的制备工艺。方法:采用正交实验设计方法,以水提取物中浸膏得率,有效成分齐墩果酸和槲皮素提取率为质控指标,确定提取参数。确定了制粒方法。结果:确定乙肝转阴颗粒的最佳水提取工艺为10倍量水,煎煮3次,每次1.5h。制粒方法以干膏粉末:淀粉:糊精:蔗糖=5:6:4:2为最佳。结论:乙肝转阴颗粒制备工艺稳定,可行。目的:建立乙肝转阴颗粒的质量标准。方法:采用TLC法定性鉴别了小田基黄、白花蛇舌草;分别以槲皮素、齐墩果酸为对照品,用HPLC法分别测定颗粒中槲皮素与齐墩果酸的含量。色谱柱:Hanbon Sci.&Tech. Dubhe C18色谱柱(4.6mm*250mm 5μm),流动相分别为:甲醇:0.4%磷酸=45:55,甲醇:水=87:13;检测波长分别为:360nm,212nm;流速:1.0ml·min-1,柱温:35℃。结果:在选定的薄层条件下,小田基黄、白花蛇舌草的薄层图谱清晰,分离度好。颗粒中槲皮素的线性范围:0.0544.320μg(R2=0.9994),平均回收率为99.94%,RSD=1.00%。齐墩果酸线性范围:0.1072.140μg (R2=0.9993),平均回收率为100.46%,RSD=0.99%。结论:本方法简便,灵敏度高,可有效地控制乙肝转阴颗粒的质量。目的:研究乙肝转阴颗粒(YGZYG)对小鼠对乙酰氨基酚所致急性肝损伤的保护作用及其机制。方法:采用对乙酰氨基酚(AP)皮下注射小鼠,建立AP肝损伤模型。实验中,把昆明种小鼠随机分为正常对照组(NC组),模型组(AP model组),YGZYG高(YGZYGH)、YGZYG中(YGZYGM)、YGZYG低(YGZYGL)剂量组,阳性对照组。观察肝脏重量指数,脾脏重量指数,胸腺重量指数;测定血清AST、ALT、碱性磷酸酶(ALP)活性,血清白蛋白(Alb)含量以及总抗氧化能力(T-AOC);肝组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性。HE染色观察各组小鼠肝细胞损伤程度。结果:与模型组比较,YGZYG能减轻肝脏和胸腺重量,对脾脏重量无明显影响;降低血清AST、ALT、ALP活性,肝组织TP、MDA含量;增加血清Alb含量、T-AOC水平,肝组织SOD活性(P<0.01或P<0.05);能够减轻肝细胞损伤程度。结论:YGZYG对小鼠化学性肝损伤具有保护作用,其机制可能与其抗氧自由基、抑制脂质过氧化作用有关。目的:研究乙肝转阴颗粒对刀豆蛋白A(Con A)所致小鼠急性肝损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法:60只小鼠随机分为正常对照组(NC组),模型组(AP model组),YGZYG高(YGZYGH)、YGZYG中(YGZYGM)、YGZYG低(YGZYGL)剂量组实验首日上午,除正常对照组尾静脉注射无菌PBS(磷酸盐缓冲液)外,其余各组小鼠均尾静脉注射Con A 20mg/kg。连续给药5天,YGZYG各组的剂量分别为400、200和100 mg/kg,各剂量组均采用口服灌胃给药。末次给药后4h,正常对照组再次尾静脉注射无菌PBS,其余各组小鼠则尾静脉注射Con A 20mg/kg,禁食,不禁水。8h后,各组小鼠摘眼球取血,检测各组小鼠血清中ALT、AST、AKP活性,肝微粒体NO含量;肝组织MDA含量、SOD活性;免疫组织化学法观察肝组织Bax及Bcl-2的表达;HE染色观察各组小鼠肝细胞损伤程度。结果:与模型组比较,YGZYG各剂量组能显著降低血清ALT、AST、AKP活性,降低肝微粒体NO含量以及肝组织MDA含量;增强肝组织SOD活性(P<0.05或P<0.01);病理切片结果表明YGZYG各组能够不同程度地减轻肝细胞的损伤。免疫组化结果表明YGZYG各剂量组可不同程度地下调Bax及Bcl-2的表达。结论:YGZYG对Con A致小鼠免疫性肝损伤具有明显的保护作用,其机制可能与下调NO浓度,抗细胞凋亡,抑制脂质过氧化有关。
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