草鱼和银鲫肠道产消化酶细菌的研究

论文摘要

本试验以草鱼（Ctenopharyngodon idellus）和银鲫（Carassius auratus gibelio）为试验对象,研究了草鱼和银鲫肠道内可分泌胞外消化酶的细菌,并将筛自草鱼肠道的高产酶活芽孢杆菌以不同浓度添加到草鱼饲料中,研究芽孢杆菌对草鱼肠道菌群及肠道和肝胰脏消化酶活性的影响。在研究草鱼和银鲫肠道内可分泌胞外消化酶细菌的试验中,检测了分别从草鱼和银鲫肠道中分离的180株细菌的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶的产酶能力。结果显示,两种鱼肠道内可分泌胞外消化酶的细菌包括气单胞菌（Aeromonas）、弧菌（Vibrio）、芽孢杆菌（Bacillus）、假单胞菌（Pseudomonas）四个种属的细菌,气单胞菌在其中占优势,45.71%的气单胞菌可分泌胞外消化酶。草鱼可分泌上述四种胞外消化酶的菌株共有33株,占肠道菌总数的36.67%;银鲫43株,占银鲫肠道菌总数的47.78%。产酶菌的分布上,草鱼中肠内产消化酶细菌数量显著多于前肠和后肠（P＜0.05）,前、中、后肠分别是6株、20株和7株;银鲫中肠和后肠产酶菌数量差异不显著,前肠分布最少。草鱼分泌蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶的菌株分别有21株（23.33%）、10株（11.11%）、30株（33.33%）和16株（17.78%）。银鲫肠道内未检测到可分泌纤维素酶的细菌,蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶菌株的数量分别是21株、37株和17株。在研究芽孢杆菌Ch9对草鱼肠道菌群影响的试验中,各组饲料添加芽孢杆菌Ch9的浓度分别为1.0×109cfu/kg饲料（F1组）、3.0×109cfu/kg饲料（F3组）、5.0×109cfu/kg饲料（F5组）和不添加（F0组）。投喂周期为56d,试验中每隔14d取样一次,分别测定了草鱼肠道内好氧及兼性厌氧菌和厌氧菌的数量、种类及比例。结果显示:（1）投喂芽孢杆菌Ch9后,草鱼肠道内细菌数量基本维持在106-107cfu/g,组间并无显著差异;（2）投喂芽孢杆菌Ch9后,草鱼肠道内气单胞菌和肠杆菌（Enterobacteriaceae）比例会随着芽孢杆菌投喂量和投喂天数的增加而降低,而芽孢杆菌比例则显著升高。肠道内厌氧菌总量及双歧杆菌（Bifidobacterium）、乳酸杆菌（Lactobacillus）的数量因为芽孢杆菌的添加而增加,拟杆菌（Bacteriodes）数量则无显著变化。在研究芽孢杆菌Ch9对草鱼肠道及肝胰脏消化酶的影响的试验中,在基础同粮中分别添加1.0×109cfu/kg饲料（F1组）、3.0×109cfu/kg饲料（F3组）、5.0×109cfu/kg饲料（F5组）和不添加（F0组）芽孢杆菌,投喂平均体重约50g的草鱼,研究其对草鱼肠道、肝胰脏不同部位的蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶活性的影响。研究结果表明:芽孢杆菌Ch9在短期内（14-28d）即可增强草鱼肠道（前、中、后肠）和肝胰脏蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的活性,长时间投喂（42d-56d）其消化酶的活性不再升高,但仍高于正常水平。这表明:合适剂量的芽孢杆菌Ch9可提高草鱼肠道和肝胰脏消化酶活性,促进草鱼对食饵的消化吸收,而长期投喂对消化酶的促进作用不会进一步增强。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 综述:鱼类肠道菌群及其作用
• 1.1 鱼类肠道细菌的组成
• 1.2 鱼类消化道细菌的作用
• 1.2.1 屏障
• 1.2.2 免疫
• 1.2.3 营养
• 1.2.4 辅助消化
• 1.3 本研究的目的意义
• 第二章 草鱼和银鲫肠道产消化酶细菌的研究
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 实验动物
• 2.1.2 菌种分离
• 2.1.3 菌株产酶能力的检测
• 2.1.4 细菌鉴定
• 2.1.5 数据统计与分析方法
• 2.2 结果
• 2.2.1 草鱼肠道产酶细菌的组成特点
• 2.2.2 银鲫肠道产酶细菌的组成特点
• 2.3 讨论
• 2.3.1 鱼类肠道分泌胞外消化酶细菌的分布及组成特点
• 2.3.2 鱼类肠道产酶细菌与鱼类的消化
• 2.4 小结
• 第三章 芽孢杆菌CH9最适生长条件测定
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 菌种
• 3.2.1 试验方法
• 3.2 试验结果
• 3.2.1 最适培养条件
• 3.2.2 最适培养基
• 3.3 小结
• 第四章 芽孢杆菌CH9对草鱼肠道菌群的影响
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 实验动物及分组饲养
• 4.1.2 实验方法
• 4.2 结果
• 4.2.1 芽孢杆菌Ch9对草鱼肠道好氧及兼性厌氧菌数量的影响
• 4.2.2 芽孢杆菌Ch9对草鱼肠道好氧及兼性厌氧菌组成的影响
• 4.2.3 芽孢杆菌Ch9对草鱼肠道好氧及兼性厌氧菌组成的影响
• 4.2.4 芽孢杆菌Ch9对草鱼肠道厌氧菌数量的影响
• 4.3 讨论
• 4.3.1 芽孢杆菌Ch9对草鱼肠道好氧及兼性厌氧菌数量的影响
• 4.3.2 芽孢杆菌Ch9对草鱼肠道细菌组成的影响
• 4.4 小结
• 第五章 芽孢杆菌CH9对草鱼肠道、肝胰脏消化酶活性的影响
• 5.1 材料与方法
• 5.1.1 实验动物及饲养
• 5.1.2 实验方法
• 5.1.3 统计分析
• 5.2 结果
• 5.2.1 芽孢杆菌Ch9对草鱼蛋白酶活性的影响
• 5.2.2 芽孢杆菌Ch9对草鱼淀粉酶活性的影响
• 5.2.3 芽孢杆菌Ch9对草鱼脂肪酶活性的影响
• 5.3 讨论
• 5.3.1 芽孢杆菌Ch9对鱼类肠道及肝胰脏消化酶活性的影响
• 5.3.2 微生态制剂影响鱼类消化酶活性的原因
• 5.4 小结
• 参考文献
• 致谢
• 硕士期间发表的论文