论文题目: 尾加压素Ⅱ对心脏的作用研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 生理学
作者: 龚惠
导师: 朱依纯,姚泰
关键词: 尾加压素,一氧化氮,硫化氢,心梗,心肌细胞,免疫组化,免疫荧光双标,胱硫醚裂解酶,蛋白印迹杂交,逆转录一聚合酶链反应
文献来源: 复旦大学
发表年度: 2005
论文摘要: 尾加压素Ⅱ是最早从鱼的尾垂体分离出来的一种多肽,最近哺乳动物包括人的尾加压素Ⅱ已经被克隆出来。研究表明,尾加压素Ⅱ在心血管系统有重要作用,它曾被认为是最强的缩血管物质之一。对于不同种属的动物,静脉注射尾加压素Ⅱ产生的心血管反应有很大的差异,甚至对于同一种属的动物,报道也并不一致。尾加压素Ⅱ能增加人右心房肌的收缩力,但对左心室心肌的直接作用还有待阐明。尾加压素Ⅱ受体GPR14分布比较广泛,包括心血管组织,中枢和内分泌组织等。人们通过RT-PCR和配体受体结合实验证实GPR14在心血管的表达,但对于GPR14蛋白在心脏的表达以及它在心脏中分布的具体的细胞类型还缺乏直接的证据。另外,尾加压素Ⅱ可能会介导心肌细胞的肥大,在一些慢性缺氧或充血性心衰情况,尾加压素Ⅱ和其受体出现上调,推测尾加压素Ⅱ可能参与心血管的重构过程。一氧化氮具有舒张血管,保护心肌的作用。它参与尾加压素Ⅱ对心血管作用的调节。硫化氢是最近受到关注的具有生物活性的气体小分子,能抑制心肌收缩,舒张血管。但它是否参与尾加压素Ⅱ对心血管的作用,还需要进一步的研究。 我们主要通过免疫组化和免疫荧光双标的方法观察GPR14在心脏中的表达,结果表明,GPR14主要表达于正常大鼠左心室的心肌细胞上,在心脏的其他部分包括心房,右心室和主动脉瓣膜没有观察到GPR14蛋白的阳性表达;在心脏中其他的细胞包括冠脉血管的内皮和平滑肌细胞上未见GPR14的表达。我们利用Western blot和逆转录—聚合酶链的方法进一步证实GPR14蛋白和基因确实表达在左心室。我们又通过免疫组化的方法观察GPR14蛋白在大鼠心梗后3天和2周梗塞区边缘的表达,结果表明,与假手术组相比,GPR14在表达的量和表达的细胞类型上,均没有出现明显的变化。在房间隔缺损病人的右心房,我们观察到GPR14受体的表达,主要在靠近心外膜的心肌组织;而在右心耳,GPR14蛋白的表达与血管分布有关。 为了从功能学上进一步证实尾加压素Ⅱ受体确实表达在左心室的心肌上,我们观察了尾加压素Ⅱ对左室乳头肌的作用,结果提示,尾加压素增加左室乳头肌的收缩强度,但并不改变其他的收缩参数,包括收缩舒张速率,收缩潜伏期,达到最大收缩张力的时间以及舒张到一半的时间。我们还观察了给麻醉大鼠静脉注射尾加压素Ⅱ引起的心血管效应,主要引起左室收缩压,股动脉收缩压和舒张压,心率的下降;心肌收缩力(dp/dt)和心肌舒张能力(-dp/dt)的减弱;左室舒张压的升高:提示尾加压素Ⅱ可能对心脏具有抑制作用。我们推测在整体实验中,尾加压素Ⅱ可能通过调节其他物质如一氧化氮和硫化氢等气体小分子
论文目录:
1.中文摘要
2.英文摘要
3.前言
4.材料和方法
4.1 尾加压素Ⅱ受体GPR14在心脏中的表达
4.1.1 冰冻切片
4.1.2 石蜡切片和HE染色
4.1.3 急性分离心肌细胞
4.1.4 心梗模型的建立
4.1.5 免疫组化和免疫荧光
4.1.6 Western Blot
4.1.7 RT-PCR
4.2 尾加压素Ⅱ对正常大鼠心血管作用
4.2.1 尾加压素Ⅱ对大鼠乳头肌作用指标的测定
4.2.2 血流动力学指标测定
4.2.3 尾加压素Ⅱ对主动脉收缩作用指标的测定
4.3 尾加压素Ⅱ对心肌细胞的直接影响
4.3.1 心肌细胞的培养
4.3.2 培液中硫化氢的测定
4.3.4 细胞免疫荧光
4.3.3 RT-PCR检测CBS和CSE基因的表达
4.3.4 一氧化氮检测
4.3.5 心肌酶谱的检测
5.结果
5.1 尾加压素Ⅱ受体在心脏的表达
5.1.1 GPR14在正常大鼠心脏的表达
5.1.2 GPR14在心梗大鼠心脏的表达
5.1.3 GPR14蛋白在房间隔缺损儿童右心房和右心耳的表达
5.2 尾加压素Ⅱ的心血管作用
5.2.1 尾加压素Ⅱ对离体左室乳头肌的影响
5.2.2 静脉注射尾加压素Ⅱ对正常大鼠心功能的影响
5.2.3 尾加压素Ⅱ对离体胸主动脉的收缩作用
5.3 尾加压素Ⅱ对心肌细胞的影响
5.3.1 GPR14受体在培养的心肌细胞上的表达
5.3.2 尾加压素Ⅱ对心肌细胞分泌硫化氢的影响
5.3.3 尾加压素Ⅱ对心肌细胞分泌一氧化氮的影响
5.3.4 尾加压素Ⅱ对心肌酶谱的影响
6.讨论
6.1 GPR14受体在心脏的表达
6.2 尾加压素Ⅱ的心血管作用
6.3 尾加压素Ⅱ对心肌细胞的作用
7.结论
8.参考文献
9.致谢
10.综述
论文独创性声明
发布时间: 2005-09-19
参考文献
- [1].尾加压素Ⅱ的心血管作用及机制研究[D]. 李玲.第二军医大学2002
- [2].血浆尾加压素Ⅱ水平在相关疾病中变化的临床和基础研究[D]. 高宇.吉林大学2009
相关论文
- [1].尾加压素Ⅱ在自发性高血压大鼠心血管系统和肾脏的表达及对其肾脏功能的影响[D]. 石莹.复旦大学2007
- [2].尾加压素Ⅱ在动脉粥样硬化及血管损伤后重塑中的作用[D]. 张丽芳.中国协和医科大学2008
- [3].血浆尾加压素Ⅱ水平在相关疾病中变化的临床和基础研究[D]. 高宇.吉林大学2009
- [4].尾加压素Ⅱ的心血管作用及机制研究[D]. 李玲.第二军医大学2002
- [5].肾上腺髓质素、尾加压素Ⅱ及一氧化氮在先心病肺动脉高压中作用的研究[D]. 王涛.山东大学2004
- [6].硫化氢在脂多糖所致的急性肺损伤中的作用及其与一氧化氮的相互调节关系[D]. 周晓红.河北医科大学2006
- [7].尾加压素Ⅱ对心血管反射及中枢神经元的调控作用[D]. 武宇明.河北医科大学2006
- [8].尾加压素Ⅱ在嗜铬细胞瘤发病机制中的作用[D]. 刘国强.中国协和医科大学2003
- [9].尾加压素Ⅱ和血管紧张素Ⅱ对血管收缩的协同作用及其信号机制的研究[D]. 王艳霞.复旦大学2006
- [10].尾加压素Ⅱ在糖尿病性心肌病中的意义及其作用机制研究[D]. 戴红艳.山东大学2007
标签：尾加压素论文; 一氧化氮论文; 硫化氢论文; 心梗论文; 心肌细胞论文; 免疫组化论文; 免疫荧光双标论文; 胱硫醚裂解酶论文; 蛋白印迹杂交论文; 逆转录一聚合酶链反应论文;