论文摘要
目的研究5,4’-二-正辛烷氧基-7-二氟甲氧基金雀异黄素（7-difluoromethyl-5,4’-di-n-octylgenistein, DFOG）对体外培养人肺癌A549细胞生长和凋亡的影响，并探讨其作用机制。方法体外培养肺癌A549细胞，MTT比色法测定细胞活性。平皿集落形成法检测细胞集落形成能力。碘化丙啶（propidium iodide, PI）染色流式细胞术（flowcytometry, FCM）分析细胞周期分布和凋亡率；酶联免疫吸附法（enzyme linkedimmunosorbent assay,ELISA）测定细胞组蛋白/DNA碎片水平。Western Blot检测细胞Mcl-1蛋白表达。结果MTT比色法测定结果表明，DFOG（0.1、0.3、1.0、3.0、10.0、30.0μmol/L）作用24h，肺癌A549细胞活性随药物浓度增高逐次降低（P＜0.05）；其对细胞活性抑制的IC50值为3.9±1.2μmol/L。平皿集落形成法检测结果显示，DFOG（2.0、4.0、8.0μmol/L）以剂量依赖方式抑制肺癌A549细胞锚定依赖性生长能力（P＜0.05）。PI染色FCM分析结果证明，DFOG（2.0、4.0、8.0μmol/L）处理24h导致肺癌A549细胞系G2期细胞百分率显著增加（P＜0.05），同时，伴有G1和S期细胞百分率减少（P＜0.05）；并促进细胞凋亡率（Sub-G1细胞百分率）增高（P＜0.05）。ELISA测定结果证实，DFOG(2.0、4.0、8.0μmol/L处理24h，肺癌A549细胞组蛋白/DNA碎片水平随药物浓度增高依次增加DFOG（P＜0.05）。WesternBlot分析发现，2.0μmol/L DFOG分别处理0h、6h、12h和24h，肺癌A549细胞Mcl-1蛋白表达下调，呈时间依赖性。结论1. DFOG具有抑制肺癌A549细胞活性和生长作用，呈浓度依耐性。2. DFOG能有效诱导肺癌A549细胞凋亡，呈浓度依耐性。3. DFOG诱导肺癌A54细胞凋亡作用可能与其下调细胞Mcl-1蛋白表达有关。
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