百日草优良自交系离体保存和种子超低温贮藏

论文摘要

百日草（Zinnia elegans）为一年生草花,许多栽培品种都是由墨西哥的野生种培育而来,经过选育出的优良品种多采用种子保存,种子随保存时间的延长,活力会不断下降,这就要求不断的田间播种以更新种子活力。通过组织培养保存和超低温保存可以较好的克服这个缺点。本试验以课题组培育的3个优良自交系S5、J9、J10为材料,通过组织培养和超低温方法保存无菌苗和种子材料,探讨了百日草组织培养保存体系及适合种子超低温贮藏的方法,以期为百日草优良自交系保存提供理论和实践依据。本试验得出的结论如下：（1）组织培养保存：采用百日草成熟种子进行以苗繁苗的无菌培养,消毒过程采用二次消毒法。首次消毒先用70%的酒精处理1min,之后用0.6%NaOCl消毒20min,剥去果皮后进行第二次消毒,用0.6%NaOCl消毒5min,接种在MS培养基上,发芽率可达80.0%。无菌发芽最适合的培养基为MS,蔗糖含量为30 g/L,14h/10h的光照培养条件。百日草在不加任何激素的MS培养基上就可以增殖2.5倍,虽然BA对增殖有较显著的影响,但植株生长状态不佳。生根培养基采用不加任何激素的MS即可,移栽成活率达90%以上。在延缓生长试验中,MS+6mg/LPP333+15g/L Sucrose可以有效的延长继代时间达3个月之久。（2）超低温保存：采用正交设计试验,以自交系S5的种子为试验材料对影响超低温保存效果的主要影响因素（含水量,冰冻保护剂,冷冻和解冻）进行了分析,初步建立了百日草种子超低温保存的方法：通过控制干燥时间,使供试种子的含水量为5.54%,加入10%的二甲基亚砜作为冰冻保护剂,在0℃环境下停留45min,然后直接放入-80℃的超低温冰箱,在流水下解冻。试验证明了冰冻保护剂的重要性,经过最佳方案超低温贮藏的种子发芽率明显高于对照种子,且发芽指数和活力指数与对照无差异。用该方案贮藏J9和J10,同样得到了理想的结果,说明该方法适合百日草种子进行超低温贮藏。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 英文缩略表
• 1 前言
• 1.1 种质资源保存的研究进展
• 1.1.1 组织培养保存
• 1.1.2 超低温保存
• 1.2 组织培养保存技术研究进展
• 1.2.1 基因型
• 1.2.2 外植体种类
• 1.2.3 改变培养的物理环境
• 1.2.4 基本培养基养分水平的调整
• 1.2.5 加入生长抑制物质和高渗透压物质
• 1.3 超低温保存技术研究进展
• 1.3.1 超低温保存的理论依据
• 1.3.2 影响超低温保存效果的因素
• 1.4 本研究的目的与意义
• 1.5 本研究的立项依据与技术路线
• 1.5.1 研究背景
• 1.5.2 技术路线
• 2 材料与方法
• 2.1 试验材料
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 百日草优良自交系组织培养保存
• 2.2.2 百日草优良自交系种子的超低温保存研究
• 2.2.3 数据处理
• 3 结果与分析
• 3.1 百日草优良自交系组织培养保存结果分析
• 3.1.1 消毒时间对种子消毒效果的影响
• 3.1.2 培养基种类对种子发芽的影响
• 3.1.3 继代增殖培养
• 3.1.4 不同的多效唑浓度对继代时间的影响
• 3.1.5 百日草无菌苗的生根
• 3.1.6 百日草无菌苗的移栽
• 3.2 百日草种子的超低温保存研究
• 3.2.1 种子脱水时间与含水量的关系
• 3.2.2 超低温贮藏试验对种子各项指标的影响
• 3.2.3 不同的冷源贮藏对种子发芽率的影响
• 3.2.4 三个不同自交系的超低温贮藏试验
• 4 讨论
• 4.1 百日草优良自交系组织培养保存
• 4.2 百日草优良自交系种子的超低温保存研究
• 参考文献
• 图版与说明
• 致谢