ykl-40基因蛋白检测及其在结直肠癌的临床应用研究

论文摘要

目的:1.探讨血浆YKL-40蛋白和组织ykl-40 mRNA检测在结直肠癌的临床意义;2.探讨结直肠癌发生发展中ykl-40基因的可能作用和ykl-40与nm23-H1、p53的可能相关性。方法:1.建立并应用实时荧光定量RT-PCR检测34例结直肠癌患者组织标本ykl-40、nm23-H1和p53 mRNA;2.应用商品化EIA试剂盒检测120份结直肠癌患者的血浆YKL-40,并以23例消化道良性疾病者和36例健康体检者为对照;3.分析比较血浆YKL-40和组织ykl-40 mRNA在病程、DUKE’S分期、细胞分型、淋巴结转移、肿瘤大小、癌栓、性别、年龄、发生部位等病理因素的表达差异;分析血浆YKL-40与CEA、CA199等标志物的表达差异;分析结直肠癌组织ykl-40与nm23-H1、p53基因的表达相关性。结果:1.ykl-40、nm23-H1、p53和β-actinPCR扩增产物特异且大小与设计一致;扩增效率分别为97%、99%、97%和98%。2.结直肠癌患者血浆YKL-40高于对照者,p<0.050;ROC曲线下面积AUC=0.789,72.4ng/ml为YKL-40对结直肠癌的最佳诊断阈值,在此阈值下敏感度和特异度分别达到78.2%和74.1%;YKL-40阳性率高于CEA、CA125、CA199、CA724、FER等临床常用结直肠癌肿瘤标志物,p=0.000。不同病程患者血浆YKL-40含量有差异,术后组与初发组或复发组比较p均小于0.050,复发组与初发组p=0.303;YKL-40在腺癌低分化者表达均高于高、中分化者p=0.034;YKL-40随DUKE’S分期进展而表达升高,早期（DUKE’S A/B）与中晚期（DUKE’S C/D）比较p小于0.050;淋巴结转移者YKL-40高于未转移者p<0.050;肿瘤小于4×5cm者血浆YKL-40高于大于此值者p=0.030。3.ykl-40 mRNA在腺癌低分化者表达均高于高、中分化者,p=0.013;ykl-40 mRNA随DUKE’S分期进展而表达升高,早期（DUKE’S A/B）与中晚期（DUKE’S C/D）比较p小于0.050;淋巴结转移者ykl-40 mRNA高于未转移者p<0.050。性别、年龄、癌栓形成、发生部位（结肠或直肠）等因素分析比较上ykl-40表达无差异。结论:1.本课题建立的ykl-40、nm23-H1和p53基因的mRNA实时荧光定量RT-PCR法经方法学验证证明是特异高效的实验方法。2.血浆YKL-40蛋白可作为结直肠癌辅助诊断指标、手术疗效监测指标和术后复发预测指标;血浆YKL-40与细胞分化程度、淋巴结转移和DUKE’S分期相关。结直肠癌患者血浆YKL-40表达阳性率高于CEA、CA199等标志物;联合YKL-40可提高结直肠癌的检出率。3.组织ykl-40 mRNA与肿瘤细胞分化程度、淋巴结转移和DUKE’S分期相关。结直肠癌组织的ykl-40表达阳性率高于nm23-H1和p53,表达吻合率较高,且三者有一定相关性。

论文目录

• 英文缩略词表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 引言
• 1 ykl-40 基因及其蛋白
• 2 YKL-40 蛋白与肿瘤
• 3 结直肠癌相关基因研究现状
• 4 结直肠癌肿瘤标志物应用指南
• 5 主要实验方法简介
• 6 研究目的及主要内容
• 材料和方法
• 1 研究对象
• 2 主要试剂和设备
• 3 YKL-40 蛋白及结直肠癌常用肿瘤标志物的检测
• 4 ykl-40 与nm23-H1、p53 基因mRNA 的检测
• 5 统计学方法
• 结果
• 1 结直肠癌患者血浆 YKL-40 蛋白表达
• 2 ykl-40、nm23-H1 和 p53 荧光定量 RT-PCR 方法特异性好效率高
• 3 ykl-40 mRNA 在结直肠癌的表达
• 讨论
• 1.课题建立了特异高效的ykl-40实时荧光定量RT-PCR方法
• 2.血浆YKL-40和组织ykl-40 mRNA在结直肠癌的临床意义
• 3.ykl-40在结直肠癌发生发展中可能发挥一定作用
• 4.课题后续研究
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 综述 ykl-40 基因与肿瘤