清心饮对佐剂性关节炎心血管损伤的保护作用及部分机制研究

论文摘要

目的:近年来,随着皮质激素、免疫抑制剂治疗的应用,类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）患者的生存期得到明显延长,与此同时心血管并发症也逐渐增多。心血管疾病成为RA患者的首要死亡原因。因此探索其发病机理及防治措施成为RA临床治疗中亟待解决的重要问题之一。本课题拟研究清心饮对佐剂性关节炎（adjuvant arthritis,AA）大鼠离体血管内皮依赖性舒张功能及其对同型半胱氨酸（homocysteine, Hcy）、血管细胞间粘附分子-1（vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1 ）、内皮素-1 （ endothelin-1, ET-1）、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-α, TNF-α）、白介素-1β（interleukin-1β, IL-1β）表达的影响,研究其血管保护作用机制,为临床用药提供实验依据。方法:选择体重150-180g的Wistar大鼠,雌雄各半。测量双侧足爪容积后,于右后足跖部常规消毒,皮内注射完全弗氏佐剂（0.1ml/只）建立AA大鼠模型。其中10只大鼠用相同方法注入等量生理盐水。造模后第19天将出现二次反应的大鼠随机分为模型组、甲氨喋呤（MTX）组、MTX+清心饮（MTX+QXY）组,每组10只。注入生理盐水组为空白对照组。当日测量大鼠体重、用自制容积测量仪测量各组大鼠足爪容积。各治疗组连续灌胃给药（模型组灌胃给予等量生理盐水）21天,于给药结束后第2天测量各组大鼠足爪容积、体重后,3%戊巴比妥麻醉,腹主动脉取血,分别留取血清、血浆。放射免疫法检测大鼠血浆ET-1,血清TNF-α、IL-1β,ELISA法检测血清VCAM-1,循环酶法检测血清Hcy;取血后立即打开胸腔,取出胸主动脉,分离周围脂肪及结缔组织,保留血管内皮,截取长为3-4mm的主动脉环,主动脉环浴皿法检测内皮依赖性舒张功能;剩余部分动脉,经固定、脱水、包埋、染色,免疫组织化学法检测血管内皮细胞VCAM-1的表达。统计学处理:所有数据均采用SPSS for windows 13.0软件包进行统计学处理,所得结果均以X±S表示。各组间均数比较采用单因素方差分析。结果:1 QXY对AA大鼠一般情况的影响与模型组比较,MTX组、MTX+QXY组一般情况均有所改善。造模后,模型组、MTX组与MTX+QXY组体重明显低于空白对照组（P<0.01）,但模型组、MTX组与MTX+QXY组间无差异（P>0.05）;灌胃完毕,模型组、MTX组与MTX+QXY组体重明显低于空白对照组（P<0.01）,模型组与MTX组明显低于MTX+QXY组（P<0.01）,模型组明显低于MTX组（P<0.01）;MTX、模型组体重增加明显低于空白对照组（P<0.01）,MTX、模型组体重增加明显低于MTX+QXY组（P<0.01）,MTX+QXY组体重增加值与空白对照组比较无显著性差异（P>0.05）,模型组体重增加明显低于MTX组（P<0.01）。2 QXY对AA大鼠足爪肿胀的抑制作用给药3周后,MTX组、MTX+QXY组造模侧足爪平均肿胀度明显低于模型组（P<0.01）,MTX组与MTX+QXY组比较无明显差异（P>0.05）,但MTX+QXY组对造模侧肿胀足爪的抑制率稍优于MTX组（58.20% VS 54.7%）。（2）MTX组、MTX+QXY组非造模侧平均肿胀度明显低于模型组（P<0.01）,MTX+QXY组与MTX组比较无显著差异（P>0.05）,但MTX+QXY组对非造模侧肿胀足爪的抑制率稍优于MTX组（48.49% VS 44.20%）。3 QXY对AA大鼠内皮依赖性舒张功能的影响主动脉环对乙酰胆碱（acetylcholine, Ach）引起的内皮依赖性舒张作用（%）各个浓度（10-9 mmol/L、10-8 mmol/L、10-7 mmol/L、10-6 mmol/L）中模型组、MTX组、MTX+QXY组均明显低于空白对照组,差异有显著性（P<0.01、0.05）,模型组、MTX组明显低于MTX+QXY组（P<0.01）;从10-8 mmol/L开始,模型组明显低于MTX组,差异有显著性（P<0.05、0.01）。主动脉环对硝普钠（sodiumnitroprusside, NaNP）引起的非内皮依赖性舒张作用（%）中前两个浓度（即10-9mmol/L、10-8mmol/L）各组间存在明显差异,显著性水平从0.05到0.01不等,后两个浓度（10-7 mmol/L、10-6 mmol/L）各组间均无明显差异（P>0.05）。4 QXY对AA大鼠对血清TNF-α、IL-1β,血浆ET-1,血清Hcy,血清及血管内皮细胞VCAM-1的影响4.1血清TNF-α、IL-1β水平比较,模型组、MTX组明显高于空白对照组（P<0.01）,模型组、MTX组明显高于MTX+QXY组（P<0.01）,MTX+QXY组与空白对照组比较无明显差异（P>0.05）,模型组明显高于MTX组（P<0.01）;4.2血浆ET-1水平比较,模型组、MTX组与MTX+QXY组明显高于空白对照组（P<0.01）,模型组、MTX组明显高于MTX+QXY组（P<0.05）,模型组与MTX组比较无明显差异（P>0.05）。4.3.1血清VCAM-1水平比较,模型组、MTX组明显高于空白对照组（P<0.01）,模型组、MTX组明显高于MTX+QXY组（P<0.01）,MTX+QXY组与空白对照组无显著差异（P>0.05）,模型组明显高于MTX组（P<0.01）。4.3.2动脉内皮细胞VCAM-1（灰度值）比较,模型组、MTX组明显高于空白对照组,差异有显著性（P<0.01）,模型组、MTX组明显高于MTX+QXY组（P<0.05）,模型组明显高于MTX组,差异有显著性（P<0.01）,MTX+QXY组与空白对照组比较无明显差异（P>0.05）。4.4血清Hcy水平比较,模型组、MTX组与MTX+QXY组明显高于空白对照组,差异有显著性（P<0.01）,模型组、MTX组明显高于MTX+QXY组,差异有显著性（P<0.01）,模型组与MTX组比较无明显差异（P>0.05）。结论:1 AA大鼠血清Hcy、VCAM-1及血浆ET-1水平明显升高,主动脉内皮依赖性舒张功能明显下降,说明AA大鼠存在心血管损害的相关因素。2清心饮具有显著抗炎作用。清心饮联合MTX可明显降低AA大鼠足爪肿胀度及血清炎性细胞因子TNF-α、IL-1β水平。3清心饮对AA大鼠血管内皮损伤具有保护作用。清心饮可明显改善AA大鼠主动脉内皮依赖性舒张功能,降低血浆ET-1,血清VCAM-1、Hcy水平,减少胸主动脉内皮细胞VCAM-1的表达,从而改善AA大鼠血管内皮损伤。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 研究论文 清心饮对佐剂性关节炎心血管损伤的保护作用及部分机制研究
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 类风湿关节炎心血管损伤的研究进展
• 致谢
• 个人简历