论文题目: 整合素α5、β3在子宫内膜异位症中表达的研究
论文类型: 硕士论文
论文专业: 妇产科学
作者: 成杰
导师: 任慕兰
关键词: 子宫内膜异位症,异位内膜,在位内膜,体外培养,整合素,整合素
文献来源: 东南大学
发表年度: 2005
论文摘要: 目的:探讨整合素在子宫内膜异位症在位内膜和异位内膜中的表达及其性激素依赖性,并研究雌激素、孕激素、抗雌激素制剂、抗孕激素制剂对体外培养的人异位子宫内膜细胞整合素α5、β3mRNA表达的影响,寻求整合素在子宫内膜异位症发生发展过程中的作用,为临床诊断和治疗该疾病做进一步努力。方法:1.体外培养（1）用酶消化法处理异位内膜组织,进行原代细胞培养。用鼠抗人细胞角蛋白抗体进行上皮细胞鉴定及纯度分析。（2）用MTT法检测不同浓度的17β-雌二醇、安宫黄体酮、米非司酮、三苯氧胺对体外培养的异位内膜细胞活力的影响。（3）原代细胞全部或大部分融合后传代并分组:正常组（非药物干预组）、17β-雌二醇（E2）组、安宫黄体酮（P）组、米非司酮（Ru486）组、三苯氧胺（TAM）组,继续培养。（4）体外培养的细胞在含有浓度为10nmol/LE2、100nmol/LP、1000nmol/L Ru486、1000nmol/L TAM的DMEM/F12培养液中继续培养57天后进行收获,用RT-PCR技术对各组细胞中整合素α5、β3mRNA的表达水平进行检测。临床实验部分:（1）采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术,对18例内异症患者在位内膜、异位内膜（研究组）和18例非内异症患者宫内膜（对照组）行整合素α5、β3mRNA的检测。（2）同期放射免疫法测定内异症患者体内雌二醇（E2）、孕酮（P）、CA125水平,对内异症患者术中行AFS-r评分。结果:（1）原代细胞培养的成功率达44.4%（8/18）。（2）E2、P分别在浓度10nmol/L、100nmol/L即表现出明显的促细胞生长作用,而TAM、RU486在浓度1,000nmol/L才表现出抑制细胞生长的效果,而且表现出一定的量效相关性。（3）与对照组整合素α5的表达水平（1.082±0.069）相比,E2组（1.415±0.286）及P组（1.304±0.170）中整合素α5的表达水平均显著增高（P<0.05）,而TAM组（0.882±0.013）及RU486组（0.866±0.054）则显著降低（P<0.05）;整合素β3在E2组及P组的表达水平分别为0.844±0.003、0.803±0.005,与对照组的0.703±0.009相比,差异有统计学意义（P<0.05）,而TAM组（0.604±0.003）及RU486组（0.592±0.011）中整合素β3表达水平明显低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。（4）整合素α5、β3在内异症在位内膜、异位内膜及对照组宫内膜中均有不同表达。整合素α5mRNA在内异症在位内膜、异位内膜及对照组宫内膜中表达水平分别为0.773±0.113、1.077±0.032、0.924±0.120,各组间比较具差异有统计学意义（P<0.05）;整合素β3mRNA在内异症在位内膜、异位内膜及对照组宫内膜中表达水平分别0.653±0.080、、0.963±0.132、0.763±0.090,各组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。（5）内异症组血清E2水平与异位内膜整合素α5、β3mRNA表达均呈正相关性,相关系数分别为0.793、0.917,P均小于0.05, CA125水平与异位内膜整合素α5、β3mRNA表达均呈正相关性,相关系数分别为0.763、0.754,P均小于0.05,AFS-r与异位内膜整合素α5、β3mRNA表达均呈正相关性,相关系数分别为0.801、0.773,P均小于0.05。结论:整合素α5、β3在内异症发生发展中起着一定作用。（1）E2、P能刺激异位内膜细胞的生长,而TAM、RU486则抑制异位内膜细胞的生长,而且表现出一定的量效依赖性。（2）整合素α5、β3表达受雌、孕激素调控,E2、P上调整合素α5、β3的表达, TAM、RU486抑制整合素α5、β3分子表达。（3）内异症异位内膜组织中整合素α5、β3高表达可能与内异症粘连形成有关。（4）整合素α5、β3分子有望与CA125一样作为辅助诊断内异症的相关指标。
论文目录:
中文摘要
English Abstracts
文中缩略词表
前言
文献综述
第一节 整合素在内异症中的研究进展
1. 内异症发病机理的研究
2. 子宫内膜异位症粘连的形成及与粘附分子关系
3. 整合素在子宫内膜异位症中的研究
3.1 整合素的分子生物学特征及其功能
3.2 整合素在正常子宫内膜中的表达
3.3 影响整合素表达的调控因素
3.4 整合素与子宫内膜容受性
3.5 EM 在位内膜和异位内膜中整合素的表达
3.6 整合素与不孕症
第二节 内异症的诊治进展
1.性激素与子宫内膜异位症
2. 子宫内膜异位症的诊断进展
3.子宫内膜异位症的治疗进展
第一章 材料和方法
1 实验材料和仪器设备
2 异位内膜细胞原代培养
3 异位内膜细胞的鉴定
4 MTT(四甲基偶氮唑蓝微量酶反应)观察细胞活力
5 异位内膜细胞的传代培养
6 体外传代培养的异位内膜细胞中整合素α5、β3 mRNA 的检测
7 EM异位内膜及在位内膜和非EM宫内膜组织中整合素α5、β3mRNA的检测
8 水平式琼脂糖凝胶电泳
9 统计学方法
第二章 实验结果
1. 异位内膜细胞的原代细胞培养
2. 细胞鉴定结果
3. MTT 检测结果
4. 各药物干预组中整合素α5、β3mRNA 的检测
5. EM 在位内膜、异位内膜及非EM 宫内膜组织中整合素α5、β3mRNA 的检测
6. 临床资料与异位内膜组织中整合素α5、β3 表达水平的相关性分析
第三章 讨论
1. 异位内膜体外细胞培养
2. 内异症发病机理的研究
3. 性激素对体外培养的异位内膜细胞中整合素α5、β3 mRNA 的表达水平的影响
4. EM 患者E2、P、CA125 水平及AFS-r 与异位内膜组织中整合素α5、β3 的关系
结论
照片
致谢
作者简介
主要参考文献
发布时间: 2007-06-11
参考文献
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