导读:本文包含了体外转录体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:蓝氏贾第鞭毛虫,病毒载体,微型核酶,组织蛋白酶B
体外转录体论文文献综述
田甜,宫鹏涛,张西臣,杨举,李建华[1]（2013）在《微型核酶对贾第虫组织蛋白酶B基因体外转录体切割效果的研究》一文中研究指出目的检测微型核酶对篮氏贾第鞭毛虫(简称贾第虫)组织蛋白酶B基因体外转录体的切割效率。方法用RNA draw软件对贾第虫组织蛋白酶B基因序列二级结构进行模拟分析,并按照微型核酶设计的原则,选取合适的核酶切割位点,设计微型核酶序列,构建含贾第虫组织蛋白酶B基因短反义序列和长反义序列的两个微型核酶嵌合型犬贾第虫病毒重组质粒(CRzS和CRzL),以叁磷酸甘油醛脱氢酶基因的微型核酶(GRzL)和无核酶的组织蛋白酶B基因(PCB)重组质粒作对照。将重组质粒线性化后体外转录为mRNA,然后用微型核酶体外切割组织蛋白酶B基因转录体,采用实时荧光定量PCR检测切割效率。结果微型核酶CRzS和CRzL对组织蛋白酶B基因转录体切割效率分别为75.42%和83.14%,微型核酶GRzL的切割效率为0.02%,无核酶PCB切割效率为23.0%。结论微型核酶可有效切割贾第虫组织蛋白酶B基因转录体,为开展体内抑制组织蛋白酶B基因表达试验奠定了基础。(本文来源于《中国病原生物学杂志》期刊2013年04期）
陈丽凤,李建华,邹亚学,赵月平,曹利利[2]（2007）在《犬贾第虫病毒转染载体介导的锤头状核酶对KRR1基因体外转录体切割效果的研究》一文中研究指出目的检测犬贾第虫病毒介导的锤头状核酶对犬贾第虫滋养体核仁功能性蛋白KRR1基因体外转录体切割效率。方法将两端携带反义KRR1基因的锤头状核酶(ribozyme,R酶)插入犬贾第虫病毒(Giardia canis virus,GCV)转染载体中,构建两个核酶嵌合型犬贾第虫病毒载体:短反义序列,上游及下游均为21个碱基,形成重组质粒KRzS;长反义序列,上游为288个碱基,下游为507个碱基,形成重组质粒KRzL。另设两种阴性对照,即重组质粒TRzL(即R酶两端含虫体反义磷酸丙糖异构酶基因,上游为324个碱基,下游为380个碱基)和重组质粒PKR(即犬贾第虫病毒转染载体中仅有KRR1基因的反义片段而无R酶功能区)。应用荧光实时定量RT-PCR法检测嵌合型锤头状核酶体外对KRR1基因mRNA切割活性。结果KRzS、KRzL转录体对KRR1基因体外转录RNA切割效率分别达到74.0%和81.1%。而PKR对KRR1 mRNA反转录的影响较小,RT-PCR效率仅降低12.0%。TRzL对KRR1 mRNA反转录几乎无影响。结论犬贾第虫病毒介导的锤头状核酶对KRR1基因体外转录体能进行有效切割,为以后的体内锤头状核酶对KRR1基因表达抑制试验提供依据。(本文来源于《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》期刊2007年04期）
曹利利[3]（2007）在《犬贾第虫病毒感染性体外转录体的制备及转染试验》一文中研究指出本研究根据犬贾第虫病毒(长春株)基因序列设计一套含T7启动子的特异性重迭引物,构建犬贾第虫病毒基因组全长cDNA克隆,制备感染性犬贾第虫病毒体外转录体,采用体外转录体电穿孔转染和病毒粒子与无毒株滋养体共孵育两种感染方法进行感染试验,感染后每隔12h收取一次虫体,通过透射电镜观察病毒感染对无毒株滋养体细胞的影响。结果成功构建了犬贾第虫病毒基因组全长cDNA克隆,体外转录体具有感染性;转染和共孵育两种途径感染后都可检测到病毒;适量的病毒感染对细胞生长无毒性,感染后两组虫体在前24h都抑制生长,48h逐渐开始恢复生长,60h稳定生长并携病毒繁殖;电镜观察两种方法感染36h后在细胞质中都可见病毒粒子,60h细胞质中的病毒粒子呈串珠状饱满且准备外溢;72h病毒粒子均等的出现在两个核中。病毒感染导致犬贾第虫亚细胞结构改变,细胞器严重空泡化;48h后感染细胞结构与携病毒细胞无明显差异。(本文来源于《吉林大学》期刊2007-04-20）
刘全,张西臣,李建华,尹继刚,赵永军[4]（2005）在《蓝氏贾第虫病毒体外转录体转染条件的研究》一文中研究指出目的 确定蓝氏贾第虫病毒体外转录体电穿孔转染的最佳条件。方法 以不同的电击缓冲液、电压及脉冲时间应用GLV和GFP嵌合体体外转录体电穿孔转染蓝氏贾第虫,测定转染虫体的存活率及GFP表达量。结果 在不同转染条件下GLV和GFP嵌合体体外转录体均能成功转染蓝氏贾第虫,且在cytomix缓冲液、10 0 0V/cm、8ms电击条件下,对虫体损伤最小,GFP表达量最高。结论 本试验确定的蓝氏贾第虫病毒体外转录体电穿孔转染最佳条件是电击缓冲液为cytomix缓冲液,电压为10 0 0V/cm、脉冲时间为8ms。(本文来源于《中国人兽共患病杂志》期刊2005年04期）
范宝昌,赵卫,陈水平,于曼,胡志君[5]（2003）在《我国登革2、3、4型病毒全长cDNA体外RNA转录体的感染性研究》一文中研究指出目的 研究我国登革 2、3、4型病毒全长cDNA体外RNA转录体的感染性 ,为构建登革病毒的感染性克隆、深入阐明病毒的致病机理奠定基础。方法 以我国登革 2、3、4型病毒基因组全长cDNA为模板 ,用SP6RNA聚合酶系统制备体外RNA转录体 ,经电穿孔转染细胞 ,观察其致细胞病变效应。从病变细胞培养上清中提取总RNA ,用病毒特异引物进行RT PCR扩增 ,以证实细胞病变为转录体RNA的恢复病毒所致。结果 我国登革 2、3、4型病毒全长cDNA的体外RNA转录体均可使细胞产生病变 ,从细胞培养上清中可扩增出登革病毒特异的片段。结论 构建的我国登革 2、3、4型病毒全长cDNA的体外RNA转录体具有感染性 ,可在蚊传代细胞内恢复为登革病毒颗粒。(本文来源于《中华微生物学和免疫学杂志》期刊2003年09期）
黄庆生[6]（1999）在《乙脑病毒全长cDNA的扩增、克隆及体外转录制备感染性转录体的研究》一文中研究指出乙脑病毒，属黄病毒科黄病毒属成员。基因结构为单股正链RNA，全长11kb。本病毒主要侵犯中枢神经系统，且患者以儿童居多，在黄病毒中乙脑病毒引起的乙型脑炎病死率最高，年病死人数超过1万人。随着对该病毒病原学研究的深入，从基因水平探讨病毒的生物学特性，是研究其致病机理与构建新型疫苗的必由之路。 但是乙脑病毒为RNA病毒，和其它非逆转录RNA病毒一样，在复制过程中不形成DNA中间体。要利用分子生物学技术通过对病毒RNA直接进行重组、突变等方法在基因水平研究病毒的分子生物学特性存在着一定的困难，因为突变、重组、克隆等分子生物学技术都是在DNA水平上的操作。体外转录制备感染性RNA(感染性转录体)技术为RNA病毒的分子生物学研究开辟了新路。该技术是将病毒的RNA逆转录成cDNA，把全长的cDNA置于RNA聚合酶启动子的下游，在RNA聚合酶的作用下在体外转录出全长的正链RNA，经转染易感细胞后即可复制出子代病毒颗粒。由于这种子代病毒是来自cDNA，这样人们就可以在DNA水平上进行操作。重组或突变将被转录到子代病毒的RNA中，从而实现人为改造病毒达到研究其复制、表达(本文来源于《第四军医大学》期刊1999-05-01）
体外转录体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的检测犬贾第虫病毒介导的锤头状核酶对犬贾第虫滋养体核仁功能性蛋白KRR1基因体外转录体切割效率。方法将两端携带反义KRR1基因的锤头状核酶(ribozyme,R酶)插入犬贾第虫病毒(Giardia canis virus,GCV)转染载体中,构建两个核酶嵌合型犬贾第虫病毒载体:短反义序列,上游及下游均为21个碱基,形成重组质粒KRzS;长反义序列,上游为288个碱基,下游为507个碱基,形成重组质粒KRzL。另设两种阴性对照,即重组质粒TRzL(即R酶两端含虫体反义磷酸丙糖异构酶基因,上游为324个碱基,下游为380个碱基)和重组质粒PKR(即犬贾第虫病毒转染载体中仅有KRR1基因的反义片段而无R酶功能区)。应用荧光实时定量RT-PCR法检测嵌合型锤头状核酶体外对KRR1基因mRNA切割活性。结果KRzS、KRzL转录体对KRR1基因体外转录RNA切割效率分别达到74.0%和81.1%。而PKR对KRR1 mRNA反转录的影响较小,RT-PCR效率仅降低12.0%。TRzL对KRR1 mRNA反转录几乎无影响。结论犬贾第虫病毒介导的锤头状核酶对KRR1基因体外转录体能进行有效切割,为以后的体内锤头状核酶对KRR1基因表达抑制试验提供依据。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
体外转录体论文参考文献
[1].田甜,宫鹏涛,张西臣,杨举,李建华.微型核酶对贾第虫组织蛋白酶B基因体外转录体切割效果的研究[J].中国病原生物学杂志.2013
[2].陈丽凤,李建华,邹亚学,赵月平,曹利利.犬贾第虫病毒转染载体介导的锤头状核酶对KRR1基因体外转录体切割效果的研究[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志.2007
[3].曹利利.犬贾第虫病毒感染性体外转录体的制备及转染试验[D].吉林大学.2007
[4].刘全,张西臣,李建华,尹继刚,赵永军.蓝氏贾第虫病毒体外转录体转染条件的研究[J].中国人兽共患病杂志.2005
[5].范宝昌,赵卫,陈水平,于曼,胡志君.我国登革2、3、4型病毒全长cDNA体外RNA转录体的感染性研究[J].中华微生物学和免疫学杂志.2003
[6].黄庆生.乙脑病毒全长cDNA的扩增、克隆及体外转录制备感染性转录体的研究[D].第四军医大学.1999