荧光光度法在土壤Cd污染评价中的应用

论文摘要

本文探讨了用荧光光度法测定蚯蚓微粒体7-乙氧基-3-异酚噁唑酮-脱乙基酶（EROD）活性的可行性,通过一系列测定参数的优化,提高了方法的灵敏度,测定结果令人满意。论文的第一部分首先对环境污染进行了概述。重点介绍了土壤环境污染的现状、危害及土壤污染生态毒理诊断的意义、现状和研究方法。其次对生物标志物进行了详细介绍,包括生物标志物的定义、分类、测定方法以及作为生物标志物的细胞色素P450在环境污染毒理诊断中的研究进展。最后对荧光分析法进行了简单介绍。论文的第二部分是整个论文的主体部分,即用于测定蚯蚓微粒体内EROD活性的荧光分析方法的建立。基于在有氧条件下,NADPH启动EROD催化底物乙氧基试卤灵（7-乙氧基-3-异酚噁唑酮）反应生成发荧光的产物试卤灵（7-羟基-3-异酚噁唑酮）的原理,通过物理和化学参数的优化,提高了测定方法的灵敏度。在最佳实验条件下,方法的线性范围为0.5-20pmol/mL,检出限为0.04pmol/mL。标准曲线斜率大于优化前的标准曲线斜率。对10pmol/mL的试卤灵标准溶液进行11次连续平行测定,其相对标准偏差为1.1%。将所建立的方法初步用于土壤镉污染的毒理诊断,取得较好的效果。第三部分对实验进行了总结,并对EROD作为生物标志物诊断土壤低剂量Cd污染的可行性进行了展望。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 目录
• 第1章 绪论
• 1.1 环境污染
• 1.1.1 环境污染的分类
• 1.1.2 环境污染的危害
• 1.1.3 环境污染的监测
• 1.2 土壤污染生态毒理诊断
• 1.2.1 土壤污染生态毒理诊断研究意义
• 1.2.2 土壤污染生态毒理诊断研究现状
• 1.2.3 土壤污染生态毒理诊断研究方法
• 1.2.4 蚯蚓用于土壤污染生态毒理诊断的意义
• 1.3 生物标志物
• 1.3.1 生物标志物的定义及特点
• 1.3.2 生物标志物的分类
• 1.3.3 生物标志物的优势
• 1.3.4 生物标志物的研究现状
• 1.3.5 生物标志物常用的测定方法
• 1.4 细胞色素P450
• 1.4.1 细胞色素P450简介
• 1.4.2 细胞色素P450研究简史
• 1.4.3 细胞色素P450在土壤污染毒理诊断中的研究进展
• 1.5 荧光分析法简介
• 1.5.1 荧光分析法的基本原理
• 1.5.2 荧光分析法的特点
• 第2章 荧光光度法测定蚯蚓微粒体EROD活性的研究
• 2.1 引言
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 测定原理
• 2.2.2 实验仪器与材料
• 2.2.3 EROD活性测定标准曲线的绘制
• 2.2.4 土壤Cd诱导试验
• 2.2.5 生化测定
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 EROD反应条件的确定
• 2.3.2 实验参数的优化
• 2.3.3 最佳实验条件
• 2.4 分析性能
• 2.5 样品测定
• 2.6 小结
• 第3章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 在读硕士期间撰写的论文