血液病房铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗生素的耐药性及耐药基因检测

论文摘要

目的:研究血液科病房铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗生素的耐药状况,并对相关耐药基因进行检测,为临床合理应用抗生素提供参考依据。材料和方法:1.收集血液科病房患者2007年7月至2008年2月感染铜绿假单胞菌的菌株31例,采用K-B扩散法进行药敏实验,检测31株铜绿假单胞菌株对临床上常用β-内酰胺类药物的耐药性;2.利用ESBL能被CLA抑制而不能被CLO抑制,AmpC酶能被CLO抑制而不能被CLA抑制的特点,通过冻融法提取铜绿假单胞菌的酶粗提液,用改良的三维实验分析铜绿假单胞菌产生的β-内酰胺酶类型;3.应用聚合酶链反应（polymerasechain reaction PCR）检测相关耐药基因。结果:1. 31株铜绿假单胞菌中,除亚胺培南外,均对5种以上抗生素耐药,表现为多重耐药。对哌拉西林（PIP）、头孢他啶（CAZ）、头孢哌酮/舒巴坦（CFS）、庆大霉素（ GM）、头孢哌酮（CTS）、环丙沙星（CIP）、氨曲南（ATM）、亚胺培南（IPM）、头孢吡圬（FEP）的耐药率分别为32.3% ,22.6%,19.4% ,51.6%, 40.3% ,35.5%,38.7%,16.1%和25.8%。2.实验所受检的31株铜绿假单胞菌中,16株菌三维实验显示阳性结果（51.6%）,其中单一产AmpC酶菌株10株,单一产ESBLs菌株4株,同时产AmpC酶及ESBLs酶菌株1株,一株产其它β-内酰胺酶。3. 16株产β-内酰胺酶中AmpC酶基因型为DHA和ACT;产ESBL菌株为TEM型,有2株未测出耐药基因。4.本实验oprD2基因缺失率为16.1%（5/31）,未扩增出SHV、CTX-Ml、OXA、VIM型产物。结论:铜绿假单胞菌产生β-内酰胺酶是其对β-内酰胺类抗生素耐药的主要机制之一;铜绿假单胞菌产生β-内酰胺酶检出率很高,共16株,检出率为51.6%,以产AmpC酶为主;经PCR法检测有TEM型ESBL菌株,DHA型和ACT型AmpCβ-内酰胺酶,未检出其他超广谱β-内酰胺酶及VIM金属酶。

论文目录

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• 材料与方法
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